24小时热门版块排行榜

返回列表

lxh502976898

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 640.6
红花: 1
帖子: 89
在线: 84.7小时
虫号: 1140069
注册: 2010-11-06
性别: GG
专业: 药理学其他科学问题

[求助] 表达载体的链接

我第一次做目的片段和表达载体的连接，从pMD-18-T将目的片段切下连接到
PET-30a上，链接过夜后乙醇沉淀这一步就没有沉淀，也盲目的家TE溶解做转化，结果没有菌长出，请高手赐教。。。。谢谢

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有177人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

表达载体连接好后测序问题已经有17人回复
双酶切粘性末端连接不上已经有21人回复
大片段连接pET-28a表达载体已经有8人回复
构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上已经有54人回复
做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why??? 已经有24人回复
目的片段与表达载体的连接已经有23人回复
表达载体的构建已经有17人回复
双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点已经有52人回复
为什么我做的酶切连接总是不长斑呢？已经有24人回复
【求助/交流】目的基因连接表达载体后涂板不长菌已经有11人回复
【求助/交流】连接质粒的效率已经有12人回复
【求助/交流】拟改造一个表达载体，请大家帮忙分析下如何进行已经有3人回复
【求助/交流】pcr,酶切，连接，哪步可以省？已经有13人回复
【求助/交流】连接表达载体PET-28A失败原因已经有23人回复

1楼2012-08-06 09:54:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ghs25372216

禁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-06 15:10:38

本帖内容被屏蔽

2楼2012-08-06 11:09:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

lxh502976898

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 640.6
红花: 1
帖子: 89
在线: 84.7小时
虫号: 1140069
注册: 2010-11-06
性别: GG
专业: 药理学其他科学问题

引用回帖:

2楼: Originally posted by ghs25372216 at 2012-08-06 11:09:51
我都是在目的片段浓度和酶切后载体浓度比较浓的前提下，10微升连接体系：7微升目的片段1微升载体1微升酶1微升buffer，过夜连接，然后直接进行转化，从未用乙醇沉淀过，也为加过什么TE，一直结果都很好，呵呵，个人做 ...

浣犳槸鐢ㄧ殑T4杩炴帴閰跺?� 鎬庝箞涓?鎸夎鏄庝功�?氬晩