应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】连接质粒的效率
131/2返回列表12下一页
查看: 1727  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

刘小乐

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】连接质粒的效率 已有2人参与

做完PCR之后，p完的基因片段需要与质粒连接。那那位牛人知道哪些质粒的连接效率最好的？那种在大肠杆菌中能表达的,且克隆效果要好的质粒

[ Last edited by 刘小乐 on 2010-9-6 at 21:43 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

有用的收藏

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
互动互利互相学习
1楼 2010-09-06 10:09:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tomocsn

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
刘小乐(金币+1):谢谢回帖 2010-09-06 11:00:51
我们实验室用的pUcm-t     pUcm-B    pMd-18t
赞一下(1人) 回复此楼
生命不息奋斗不止
2楼2010-09-06 10:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小乐

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by tomocsn at 2010-09-06 10:35:45:
我们实验室用的pUcm-t     pUcm-B    pMd-18t

连接效率怎么样的？比如说需要连接时间长短，条件什么的
赞一下 回复此楼
互动互利互相学习
3楼2010-09-06 10:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zheng20089829

木虫 (小有名气)
★
刘小乐(金币+1):谢谢参与
要看你表达蛋白的情况选质粒的，我们用Pet 系列的，蛋白小的话可能需要融合表达
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-09-06 11:30:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw1989960

木虫 (正式写手)

快乐家族二十八
★
刘小乐(金币+1):谢谢参与
你要表达的话，需要先酶切，在连入表达载体中，一般连接酶的效率都挺高了，挑选质粒是为了好表达，双酶切方便，防止自连
赞一下(1人) 回复此楼
快乐家族
5楼2010-09-06 11:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
刘小乐(金币+1):谢谢参与
连接效率需要看你的酶切位点和片段长度已经连接酶的质量

表达常用的pet系列和pgex系列等等
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-09-06 12:18:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫
★
刘小乐(金币+1):谢谢参与
要与表达载体连接的话，要先酶切，连接效率主要决定于你的酶切位点，一般来说粘末端比平末端好连接
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-09-06 13:01:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

burkut65
刘小乐(金币+1):谢谢参与
silicare(金币-1):原因就不用说了吧 2010-09-06 18:22:47
8楼2010-09-06 14:31:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)
★
刘小乐(金币+1):谢谢参与
用过的有pet，pGEX，T载体
T载体效率最低，平端
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-09-06 15:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
★
刘小乐(金币+1):谢谢参与
没有听说过有这样去衡量一个质粒的链接效率的，片段链接效率比较一般是基于你的反应物纯度，缓冲液的适合程度和酶的效率及酶切位点的设计。
赞一下(1人) 回复此楼
For my life！
10楼2010-09-06 16:00:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 刘小乐 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +11 不知道叫什么！ 2026-03-15 13/650 2026-03-16 15:10 by 了了了了。。
[考研] 化学工程321分求调剂 +7 大米饭！ 2026-03-15 7/350 2026-03-16 10:25 by 了了了了。。
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂（085602一志愿985） +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +4 薛云鹏 2026-03-13 4/200 2026-03-13 10:40 by 学员8dgXkO
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭