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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-17 13:55:38
链接之后不需要沉淀回收吧,通常都是直接连接转化的啊,
还有就是连接体系中的ng是按照你基因大小算出来来的,不是凭空你捏造,或者照抄其他人的@
11楼2012-08-16 11:11:41
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我做的时候,都是直接连接的,没有用乙醇沉淀的,效果也挺好的。
12楼2012-08-16 16:25:00
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lxh502976898

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by tanglian8655 at 2012-08-16 11:11:41
链接之后不需要沉淀回收吧,通常都是直接连接转化的啊,
还有就是连接体系中的ng是按照你基因大小算出来来的,不是凭空你捏造,或者照抄其他人的@

请问你一般胶回收完事ng数都多少啊  你分别用多大的量 希望赐教  谢谢
13楼2012-08-16 21:02:51
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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-17 13:55:56
引用回帖:
13楼: Originally posted by lxh502976898 at 2012-08-16 21:02:51
请问你一般胶回收完事ng数都多少啊  你分别用多大的量 希望赐教  谢谢...

你不能这么问,一看就是外行了。
连接完后,我们都不做胶回收,直接转化的
连接用的量参照说明书,根据说明书来加东西
14楼2012-08-17 10:16:11
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hutingting

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-17 13:56:04
我们实验室做的,连接后不用沉淀,直接转化,酶切后胶回收,载体和插入片段要计算浓度,按摩尔比,一般1:5,用T4连接酶推荐的体系,平板长的很好
15楼2012-08-17 10:26:07
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lxh502976898

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by tanglian8655 at 2012-08-17 10:16:11
你不能这么问,一看就是外行了。
连接完后,我们都不做胶回收,直接转化的
连接用的量参照说明书,根据说明书来加东西...

我是说链接之前 的胶回收 是你没看明白
16楼2012-08-17 10:37:56
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张立梅123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Sample Text主要是确保目的基因与载体比例大约3:1至8:1,有的说37度连接2-3h也可以。我试了下,还可以的,不妨试一下啊
17楼2012-09-01 17:36:51
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