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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-17 13:55:38
链接之后不需要沉淀回收吧，通常都是直接连接转化的啊，
还有就是连接体系中的ng是按照你基因大小算出来来的，不是凭空你捏造，或者照抄其他人的@
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11楼2012-08-16 11:11:41
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我做的时候，都是直接连接的，没有用乙醇沉淀的，效果也挺好的。
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12楼2012-08-16 16:25:00
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lxh502976898

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by tanglian8655 at 2012-08-16 11:11:41
链接之后不需要沉淀回收吧，通常都是直接连接转化的啊，
还有就是连接体系中的ng是按照你基因大小算出来来的，不是凭空你捏造，或者照抄其他人的@

请问你一般胶回收完事ng数都多少啊  你分别用多大的量 希望赐教  谢谢
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13楼2012-08-16 21:02:51
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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-17 13:55:56
引用回帖:
13楼: Originally posted by lxh502976898 at 2012-08-16 21:02:51
请问你一般胶回收完事ng数都多少啊  你分别用多大的量 希望赐教  谢谢...

你不能这么问，一看就是外行了。
连接完后，我们都不做胶回收，直接转化的
连接用的量参照说明书，根据说明书来加东西
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14楼2012-08-17 10:16:11
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hutingting

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-17 13:56:04
我们实验室做的，连接后不用沉淀，直接转化，酶切后胶回收，载体和插入片段要计算浓度，按摩尔比，一般1：5，用T4连接酶推荐的体系，平板长的很好
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15楼2012-08-17 10:26:07
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lxh502976898

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by tanglian8655 at 2012-08-17 10:16:11
你不能这么问，一看就是外行了。
连接完后，我们都不做胶回收，直接转化的
连接用的量参照说明书，根据说明书来加东西...

我是说链接之前 的胶回收 是你没看明白
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16楼2012-08-17 10:37:56
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张立梅123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Sample Text主要是确保目的基因与载体比例大约3:1至8:1，有的说37度连接2-3h也可以。我试了下，还可以的，不妨试一下啊
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17楼2012-09-01 17:36:51
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