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Ryan2012

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[求助] pcr酶的问题

我最近在做重组病毒目的基因的鉴定，用近岸的2乘taqmix酶可以扩增出目的基因，用biotake的2乘taqmix和thermo scientific 的2乘PCRMM都扩增不出来目的基因是怎么回事，因为我抽的是病毒基因组，因此浓度会很低，阳性对照模版用0.3微升（80纳克/微升），目的模版用两微升，结果阳性对照很亮，电泳图谱如下：请大家帮忙分析下原因，不胜感激！

201311181s-jd2.jpg

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1楼2013-11-21 13:32:37

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Ryan2012

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附加说明：marker左侧是用thermo scientific公司的PCRMM扩增的，顺序依次为1为阴性对照，2、3为目的基因，4为阳性的质粒对照（较亮），5泳道没有点样，是在点4样时漏过去的；marker右侧的结果是用近岸公司的2乘pcr mix 酶扩增的，条带顺序依次为marker、第二泳道没有点样。3为阳性对照，4、5为目的基因，6为阴性对照，主要是想知道我用近岸公司扩增出来的条带可信度高么以及为什么会出现不同公司的酶扩增出来的结果不一样，在这里先谢谢大家了！

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2楼2013-11-21 13:46:28

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-11-21 14:01:37

不同的酶有不同的最佳引物、模板浓度，扩增速度和效率也一定相同。使用任何酶都要先阅读产品说明书。

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3楼2013-11-21 13:58:46

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