24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 7850  |  回复: 15

不离不弃1215

铜虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢?为什么? 已有5人参与

各位大神,帮帮忙呀!小妹我是荧光定量PCR的初学者,实验室有没有一个人做过荧光定量PCR 实验,现在老师把这个新东西给我了,要我建立这个体系,一切靠自己,慢慢的摸出点门道了,可是现在却出现这个问题,真的是纠结了两个月了还是没办法,现在你们是我最后的希望了。别的不多说了,大家看图吧,我用的仪器是ABIA的STEP ONE ,探针法做,结果发现曲线没有对数期,直接的一条线性曲线就出来了,而且看不到平台期,这是为什么呀?天呐,我都快被这个折磨疯了
荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢?为什么?
16s.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-01-07 08:46:10
循环数不够,模板太少,最大的可能是循环数不够,才30个……,设到45个图就好看了
金币是赌出来的
8楼2013-11-22 11:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

yangpanfei

禁虫 (正式写手)


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-18 11:02:07
本帖内容被屏蔽

2楼2013-11-18 08:50:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-18 11:02:11
你这个是多重的还是单重,看起来好像是双重的,你把体系浓度发出来,看看
3楼2013-11-18 08:58:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzliang87

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-22 13:00:46
你是用探针法做的QPCR,出现这种情况很正常的,几年前我刚刚开始做QPCR的时候这种情况也出现过,最后完美解决,呵呵。几年来一直做QPCR积累了不少经验,想详细了解的话q聊吧,比较方便,913668017
4楼2013-11-18 17:38:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不离不弃1215

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lzliang87 at 2013-11-18 17:38:04
你是用探针法做的QPCR,出现这种情况很正常的,几年前我刚刚开始做QPCR的时候这种情况也出现过,最后完美解决,呵呵。几年来一直做QPCR积累了不少经验,想详细了解的话q聊吧,比较方便,913668017

濂藉憖锛屾槑澶╁姞浣燪Q,澶劅璋簡锛?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2013-11-19 23:48:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不离不弃1215

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yangpanfei at 2013-11-18 08:50:51
可能是模板浓度太低了,都没有达到阈值的,刚开始要做不同浓度梯度的,摸一下模板浓度条件

我问了个做过定量的博士,他怀疑也是这个问题,现在我先验证下是不是这问题,非常感谢!
6楼2013-11-22 11:17:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不离不弃1215

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by love_st at 2013-11-18 08:58:17
你这个是多重的还是单重,看起来好像是双重的,你把体系浓度发出来,看看

单重的,什么是体系浓度呀?我用质粒做的结果也差不多!我不知道实验室用的东洋纺的Taq  Mix 是不是不太好用,实验室每次换Taq  Mix就要换体系和程序,我发现以前的Taq  Mix的没有这个问题!不知道Taq  Mix对结果的影响大不大?
7楼2013-11-22 11:29:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 不离不弃1215 at 2013-11-22 11:29:05
单重的,什么是体系浓度呀?我用质粒做的结果也差不多!我不知道实验室用的东洋纺的Taq  Mix 是不是不太好用,实验室每次换Taq  Mix就要换体系和程序,我发现以前的Taq  Mix的没有这个问题!不知道Taq  Mix对结果的 ...

看你引物探针dntps 镁离子的终浓度下
9楼2013-11-22 11:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不离不弃1215

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by love_st at 2013-11-22 11:36:58
看你引物探针dntps 镁离子的终浓度下...

我买的是事前已经配好的Taq mix,全部都配好了,这个没办法改变的额
10楼2013-11-23 14:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 不离不弃1215 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 297,工科调剂? +5 河南农业大学-能 2026-04-14 5/250 2026-04-18 15:17 by Equinoxhua
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 化工学硕294分,求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-16 11/550 2026-04-17 22:34 by chixmc
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +10 否极泰来2026 2026-04-15 12/600 2026-04-17 17:54 by mapenggao
[考研] 295分求调剂 +5 ?要上岸? 2026-04-17 5/250 2026-04-17 16:51 by fenglj492
[考研] 335求调剂 +20 想上岸呀!! 2026-04-12 23/1150 2026-04-17 10:50 by cuisz
[考研] 300求调剂 +11 橙a777 2026-04-15 11/550 2026-04-16 22:43 by cfdbai
[考研] 一志愿沪9,生物学326求调剂 +9 刘墨墨 2026-04-15 9/450 2026-04-16 17:14 by 崔崔崔cccc
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 297,工科调剂? +10 河南农业大学-能 2026-04-14 10/500 2026-04-15 21:50 by noqvsozv
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 一志愿浙大生物325分求调剂 +9 zysheng 2026-04-12 9/450 2026-04-12 22:31 by yuyin1233
信息提示
请填处理意见