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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么?
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不离不弃1215

铜虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么? 已有5人参与

各位大神，帮帮忙呀！小妹我是荧光定量PCR的初学者，实验室有没有一个人做过荧光定量PCR 实验，现在老师把这个新东西给我了，要我建立这个体系，一切靠自己，慢慢的摸出点门道了，可是现在却出现这个问题，真的是纠结了两个月了还是没办法，现在你们是我最后的希望了。别的不多说了，大家看图吧，我用的仪器是ABIA的STEP ONE ，探针法做，结果发现曲线没有对数期，直接的一条线性曲线就出来了，而且看不到平台期，这是为什么呀？天呐，我都快被这个折磨疯了
荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么?
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1楼 2013-11-17 20:12:11
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不离不弃1215

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yangpanfei at 2013-11-18 08:50:51
可能是模板浓度太低了，都没有达到阈值的，刚开始要做不同浓度梯度的，摸一下模板浓度条件

我问了个做过定量的博士，他怀疑也是这个问题，现在我先验证下是不是这问题，非常感谢！
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6楼2013-11-22 11:17:10
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yangpanfei

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-18 11:02:07
本帖内容被屏蔽
2楼2013-11-18 08:50:51
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love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-18 11:02:11
你这个是多重的还是单重，看起来好像是双重的，你把体系浓度发出来，看看
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3楼2013-11-18 08:58:17
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lzliang87

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-22 13:00:46
你是用探针法做的QPCR，出现这种情况很正常的，几年前我刚刚开始做QPCR的时候这种情况也出现过，最后完美解决，呵呵。几年来一直做QPCR积累了不少经验，想详细了解的话q聊吧，比较方便，913668017
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4楼2013-11-18 17:38:04
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