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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问为何定量PCR染料法胶上有条带而没有扩增曲线。
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open1230

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请问为何定量PCR染料法胶上有条带而没有扩增曲线。

请问为何定量PCR染料法胶上有条带而没有扩增曲线。
目前已试过将程序发至试剂盒厂家，让同学用他的试剂跑我的样本，自己的试剂重复等方式，但均为发现问题所在。请问各位还有什么办法？引物合成纯化方式是PAGE，生工合成。所用试剂是英骏的试剂盒，反应条件是95，60，72。包括内参都没出来。引物序列在文献里找的（IF：8）在NCBI上对比过。谢谢！
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1楼 2011-09-01 16:08:32
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blackrose8089
2楼2011-09-01 16:09:31
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hf0072006

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-09-01 16:09:31:

看到你这个头像好乖
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3楼2011-09-02 08:44:42
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open1230

铜虫 (初入文坛)
自己顶！
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4楼2011-09-02 09:54:00
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huangvnh

新虫 (初入文坛)
这位前辈，我现在也遇到这种问题，请问怎么解决？
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5楼2012-07-24 09:05:56
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somer2012

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能的原因：1.试剂盒里的染料有问题，无法被仪器检测到。
            2.仪器的问题：比如无法检测到荧光
            3. 软件的问题：比如是否选择了正确的染料选项等
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6楼2012-07-28 15:19:36
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cocoslee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是软件没有调到正确的选项？建议先问一下仪器的厂家，怎么调试软件才能看到溶解曲线，试剂一般都没问题。
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7楼2012-11-15 10:01:23
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