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open1230

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请问为何定量PCR染料法胶上有条带而没有扩增曲线。

请问为何定量PCR染料法胶上有条带而没有扩增曲线。
目前已试过将程序发至试剂盒厂家,让同学用他的试剂跑我的样本,自己的试剂重复等方式,但均为发现问题所在。请问各位还有什么办法?引物合成纯化方式是PAGE,生工合成。所用试剂是英骏的试剂盒,反应条件是95,60,72。包括内参都没出来。引物序列在文献里找的(IF:8)在NCBI上对比过。谢谢!
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cocoslee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是软件没有调到正确的选项?建议先问一下仪器的厂家,怎么调试软件才能看到溶解曲线,试剂一般都没问题。
7楼2012-11-15 10:01:23
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hf0072006

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-09-01 16:09:31:

看到你这个头像好乖
3楼2011-09-02 08:44:42
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huangvnh

新虫 (初入文坛)

这位前辈,我现在也遇到这种问题,请问怎么解决?
5楼2012-07-24 09:05:56
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somer2012

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能的原因:1.试剂盒里的染料有问题,无法被仪器检测到。
            2.仪器的问题:比如无法检测到荧光
            3. 软件的问题:比如是否选择了正确的染料选项等
6楼2012-07-28 15:19:36
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