24小时热门版块排行榜    

查看: 906  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)


[交流] PCR引物问题

根据保守序列设计了一对引物,上下游GC含量都是28.6%,tm均为值50.2,长度均为21.请问这样GC含量低的引物适不适合来做PCR?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)


引用回帖:
6楼: Originally posted by 笨熊zhou at 2013-11-11 14:59:35
一般不能但看GC含量,而要由引物的Tm值来综合判断,一般Tm值在2C以内。而Tm值主要由两个因素控制:GC含量和碱基数目。只要GC含量在40-60%都是可以接受的。12%只要Tm值不超过2C,应该是可以的。但是,您为何要 ...

真菌保守序列ITS区,序列已知。
7楼2013-11-11 16:31:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

三蛰

铜虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yuren2009: 金币+2 2013-11-10 21:15:52
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-10 23:01:07
GC值太低,导致tm值也较低,对目的dna的解链会有影响。
2楼2013-11-10 18:40:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lovebirdshs

木虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
yuren2009: 金币+2 2013-11-10 21:15:58
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-10 23:01:14
PCR这种实验有时候很靠感觉的,PRIMER评分很高的引物扩增效果不一定理想,而有些引物分数比较低但扩增的却很好,这相信大家都经历过的,具体还是个最好试一下,反正合引物又用不了几个钱
4楼2013-11-10 19:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yuren2009: 金币+2 2013-11-11 09:47:50
我经常自己用眼睛瞅,看出后再用软件检测一下。引物各项指标好的不一定能扩增成功,以实际效果为准
5楼2013-11-11 09:14:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +6 瞬息宇宙 2026-09-01 12/600 2026-09-02 16:56 by tjutjulee
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
信息提示
请填处理意见