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syct

新虫 (初入文坛)

[求助] ISSR-PCR的引物问题是只用1条?

UBC公布的100条ISSR通用引物为何不分正反引物?
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syct

新虫 (初入文坛)

可能没说清楚,我想问ISSR-PCR过程所使用的引物是不是只有1条,但1条引物能正常PCR吗?
2楼2012-04-03 01:18:49
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3楼2012-04-03 14:59:38
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syct

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-03 14:59:38:

谢谢斑竹
4楼2012-04-03 23:06:46
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双鱼坤非

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
听论坛里的高人讲,首先是选一两条能扩增出条带的进行条件优化,用优化的体系对剩下的引物进行筛选!
做最好的自己!加油
5楼2012-04-04 14:37:32
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yxwjimmy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-05 11:35:20
研究一下ISSR的原理就能明白了。
ISSR(inter-simple sequence repeat)是Zietkeiwitcz等于1994年发展起来的一种微卫星基础上的分子标记。其基本原理是:用锚定的微卫星DNA为引物,即在SSR序列的3'端或5'端加上2-4个随机核苷酸,在PCR反应中,锚定引物可引起特定位点退火,导致与锚定引物互补的间隔不太大的重复序列间DNA片段进行PCR扩增。所扩增的inter SSR区域的多个条带通过聚丙烯酞胺凝胶电泳或者琼脂糖凝胶电泳得以分辨,扩增谱带多为显性表现。

http://www.hudong.com/wiki/issr
6楼2012-04-05 11:20:09
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syct

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yxwjimmy at 2012-04-05 11:20:09:
研究一下ISSR的原理就能明白了。
ISSR(inter-simple sequence repeat)是Zietkeiwitcz等于1994年发展起来的一种微卫星基础上的分子标记。其基本原理是:用锚定的微卫星DNA为引物,即在SSR序列的3'端或5'端加上2-4个 ...

这个定义我看过无数次~~~对于接触过的很简单,但对没接触过ISSR的新手来说,还是会费解的~~~这几天在图书馆查资料,已经明白了
7楼2012-04-06 00:06:57
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syct

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 双鱼坤非 at 2012-04-04 14:37:32:
听论坛里的高人讲,首先是选一两条能扩增出条带的进行条件优化,用优化的体系对剩下的引物进行筛选!

第一次做ISSR,筛选引物(选的引物有点少)的时候什么都没P出来,所以就从头思考了
8楼2012-04-06 00:07:50
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飞雨朝云

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by syct at 2012-04-03 01:18:49:
可能没说清楚,我想问ISSR-PCR过程所使用的引物是不是只有1条,但1条引物能正常PCR吗?

对的,ISSR的引物可以用1条,也可以两条混用~~~前提是这两条引物都能P出条带
9楼2012-04-06 00:15:36
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wglpandora

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主   能加我Q吗791521400   我刚刚接触  ISSR  什么都 不太 懂,想找你学学,,,谢谢!
10楼2013-06-11 10:21:47
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