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shihongling

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】稀释PCR引物用的TE已有13人参与

鄙人稀释PCR引物时误用了含有RNA酶的1×TE缓冲液,怎么办呢?能不能抱有侥幸心理希望引物没有这么快被降解掉呢?一失足成千古恨啊!
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weinerchen

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+1): 鼓励新虫,欢迎常来交流~~ 2011-03-02 15:12:34
你是新手吧?
个人觉得希望渺茫,还是再去和下引物吧,价格也不贵,不要因为侥幸而浪费更多的时间与精力,实验过程讲究细心,下次可不能这么马虎啦!
2楼2011-03-02 13:39:59
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+1): 鼓励参与交流~~ 2011-03-02 15:13:03
PCR引物一般是DNA吧?怎么会被RNA酶降解掉,只是不知RNA酶会不会影响后续使用,还是重合成一管比较保险
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
3楼2011-03-02 13:54:29
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shihongling

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by weinerchen at 2011-03-02 13:39:59:
你是新手吧?
个人觉得希望渺茫,还是再去和下引物吧,价格也不贵,不要因为侥幸而浪费更多的时间与精力,实验过程讲究细心,下次可不能这么马虎啦!

谢谢!还是用新的引物吧!
4楼2011-03-02 14:15:28
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shourjruo

铜虫 (小有名气)

重新合成吧~
当思考成为习惯,成功将不期而至。
5楼2011-03-02 14:33:30
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leiyunting

木虫 (著名写手)

云海波涛

★ ★
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1949stone(金币+1): 鼓励交流 2011-03-02 15:14:33
先做几管试试呗,要是符合预期结果的话,可以保留;实在不行换引物啦

能省则省
云海漾空阔,风露凛高寒;何必在波涛,然后惊沉浮。
6楼2011-03-02 14:44:48
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
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最爱花诗雨(金币+2): good 2011-03-02 15:14:04
如果这个引物不用于逆转录,何惧?
普通RT-PCR,逆转录用的是oligo dT或者随机引物
等到用上你合成的扩增引物时,都已经是面向cDNA了

EDTA的含量足够低的话,不会影响PCR反应
7楼2011-03-02 14:46:51
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shihongling

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-02 14:46:51:
如果这个引物不用于逆转录,何惧?
普通RT-PCR,逆转录用的是oligo dT或者随机引物
等到用上你合成的扩增引物时,都已经是面向cDNA了

EDTA的含量足够低的话,不会影响PCR反应

谢谢!我先做做看!
8楼2011-03-02 15:19:07
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物是DNA,RNA酶应该对其没有影响,你可以P一次,看看能不能出结果,刚好我们也可以学习一下,如果能出来结果,说明我们的分析是对的,如果不能出结果,则让我长了新的见识!
9楼2011-03-02 16:24:46
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shihongling

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by guoxingjun2008 at 2011-03-02 16:24:46:
引物是DNA,RNA酶应该对其没有影响,你可以P一次,看看能不能出结果,刚好我们也可以学习一下,如果能出来结果,说明我们的分析是对的,如果不能出结果,则让我长了新的见识!

P出来了,结果很理想,说明RNA酶对单链DNA没有影响的。
10楼2011-03-03 16:34:35
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