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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】稀释ＰＣＲ引物用的ＴＥ
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shihongling

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】稀释ＰＣＲ引物用的ＴＥ 已有13人参与

鄙人稀释ＰＣＲ引物时误用了含有ＲＮＡ酶的１×ＴＥ缓冲液，怎么办呢？能不能抱有侥幸心理希望引物没有这么快被降解掉呢？一失足成千古恨啊！
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1楼 2011-03-02 12:58:18
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weinerchen

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+1): 鼓励新虫，欢迎常来交流~~ 2011-03-02 15:12:34
你是新手吧？
个人觉得希望渺茫，还是再去和下引物吧，价格也不贵，不要因为侥幸而浪费更多的时间与精力，实验过程讲究细心，下次可不能这么马虎啦！
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2楼2011-03-02 13:39:59
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+1): 鼓励参与交流~~ 2011-03-02 15:13:03
PCR引物一般是DNA吧？怎么会被RNA酶降解掉，只是不知RNA酶会不会影响后续使用，还是重合成一管比较保险
赞一下(2人) 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2011-03-02 13:54:29
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shihongling

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by weinerchen at 2011-03-02 13:39:59:
你是新手吧？
个人觉得希望渺茫，还是再去和下引物吧，价格也不贵，不要因为侥幸而浪费更多的时间与精力，实验过程讲究细心，下次可不能这么马虎啦！

谢谢！还是用新的引物吧！
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4楼2011-03-02 14:15:28
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shourjruo

铜虫 (小有名气)
重新合成吧～
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当思考成为习惯，成功将不期而至。
5楼2011-03-02 14:33:30
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leiyunting

木虫 (著名写手)

云海波涛
★ ★
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1949stone(金币+1): 鼓励交流 2011-03-02 15:14:33
先做几管试试呗，要是符合预期结果的话，可以保留；实在不行换引物啦

能省则省
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云海漾空阔，风露凛高寒；何必在波涛，然后惊沉浮。
6楼2011-03-02 14:44:48
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+2): good 2011-03-02 15:14:04
如果这个引物不用于逆转录，何惧？
普通RT-PCR，逆转录用的是oligo dT或者随机引物
等到用上你合成的扩增引物时，都已经是面向cDNA了

EDTA的含量足够低的话，不会影响PCR反应
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7楼2011-03-02 14:46:51
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shihongling

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-02 14:46:51:
如果这个引物不用于逆转录，何惧？
普通RT-PCR，逆转录用的是oligo dT或者随机引物
等到用上你合成的扩增引物时，都已经是面向cDNA了

EDTA的含量足够低的话，不会影响PCR反应

谢谢！我先做做看！
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8楼2011-03-02 15:19:07
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物是DNA，RNA酶应该对其没有影响，你可以P一次，看看能不能出结果，刚好我们也可以学习一下，如果能出来结果，说明我们的分析是对的，如果不能出结果，则让我长了新的见识！
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9楼2011-03-02 16:24:46
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shihongling

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by guoxingjun2008 at 2011-03-02 16:24:46:
引物是DNA，RNA酶应该对其没有影响，你可以P一次，看看能不能出结果，刚好我们也可以学习一下，如果能出来结果，说明我们的分析是对的，如果不能出结果，则让我长了新的见识！

P出来了，结果很理想，说明RNA酶对单链DNA没有影响的。
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10楼2011-03-03 16:34:35
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