应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测序质粒提不出来
51/1返回列表
查看: 1564  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] 测序质粒提不出来

构建了一个质粒，转到大肠杆菌之后，挑单菌落活化再重新提质粒，酶切验证以后，发现大小是对的，就取了一部分菌液送去测序，结果测序公司说质粒提不出来，不清楚是怎么回事，有遇到类似情况的吗？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

测序相关问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-28 10:48:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 16:32:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2013-10-28 16:02:40
我自己提的浓度达不到测序公司的要求，他要求200ng/ul，我只能提到几十纳克。...

那就有可能是你的质粒有问题了，在确定试剂和操作方法没问题的情况下再提一下，有可能是拷贝数低，有可能是其他问题~~

最直接的解决办法：想达到浓度，就多摇几管菌小提，最后洗脱是用一管的洗脱液量去洗脱多管，看一下浓度如何吧

或者做一下分区划线，筛选+活化一下
赞一下 回复此楼
岂能尽如人意，但求无愧我心
4楼2013-10-28 17:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1 2013-10-28 15:03:35
你自己提一遍，如果没问题就把菌液和提取的质粒同时给他，让他先提，还提不出来就用质粒测序。

还有一种可能就是测序公司不靠谱，换公司
赞一下 回复此楼
岂能尽如人意，但求无愧我心
2楼2013-10-28 14:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-28 14:53:31
你自己提一遍，如果没问题就把菌液和提取的质粒同时给他，让他先提，还提不出来就用质粒测序。

还有一种可能就是测序公司不靠谱，换公司

我自己提的浓度达不到测序公司的要求，他要求200ng/ul，我只能提到几十纳克。
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-28 16:02:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-28 17:06:05
那就有可能是你的质粒有问题了，在确定试剂和操作方法没问题的情况下再提一下，有可能是拷贝数低，有可能是其他问题~~

最直接的解决办法：想达到浓度，就多摇几管菌小提，最后洗脱是用一管的洗脱液量去洗脱多管 ...

这种情况质粒会有什么问题呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-28 18:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求b区院校调剂 +3 周56 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:17 by 周56
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 材料277求调剂 +3 min3 2026-03-24 3/150 2026-03-25 11:57 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 289求调剂 +10 硕星赴 2026-03-23 10/500 2026-03-25 10:11 by userper
[考研] 303求调剂 +3 蓝山月 2026-03-25 3/150 2026-03-25 10:04 by 雾散后相遇lc
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭