24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1611  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] 测序质粒提不出来

构建了一个质粒,转到大肠杆菌之后,挑单菌落活化再重新提质粒,酶切验证以后,发现大小是对的,就取了一部分菌液送去测序,结果测序公司说质粒提不出来,不清楚是怎么回事,有遇到类似情况的吗?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

测序相关问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-29 16:32:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2013-10-28 16:02:40
我自己提的浓度达不到测序公司的要求,他要求200ng/ul,我只能提到几十纳克。...

那就有可能是你的质粒有问题了,在确定试剂和操作方法没问题的情况下再提一下,有可能是拷贝数低,有可能是其他问题~~

最直接的解决办法:想达到浓度,就多摇几管菌小提,最后洗脱是用一管的洗脱液量去洗脱多管,看一下浓度如何吧

或者做一下分区划线,筛选+活化一下
岂能尽如人意,但求无愧我心
4楼2013-10-28 17:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1 2013-10-28 15:03:35
你自己提一遍,如果没问题就把菌液和提取的质粒同时给他,让他先提,还提不出来就用质粒测序。

还有一种可能就是测序公司不靠谱,换公司
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-10-28 14:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-28 14:53:31
你自己提一遍,如果没问题就把菌液和提取的质粒同时给他,让他先提,还提不出来就用质粒测序。

还有一种可能就是测序公司不靠谱,换公司

我自己提的浓度达不到测序公司的要求,他要求200ng/ul,我只能提到几十纳克。
3楼2013-10-28 16:02:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-28 17:06:05
那就有可能是你的质粒有问题了,在确定试剂和操作方法没问题的情况下再提一下,有可能是拷贝数低,有可能是其他问题~~

最直接的解决办法:想达到浓度,就多摇几管菌小提,最后洗脱是用一管的洗脱液量去洗脱多管 ...

这种情况质粒会有什么问题呢?
5楼2013-10-28 18:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂 +11 橙a777 2026-04-15 11/550 2026-04-16 22:43 by cfdbai
[考研] 急需调剂 +7 绝不放弃22 2026-04-15 7/350 2026-04-16 22:09 by SUSE_CL
[考研] 304求调剂 +5 castLight 2026-04-16 5/250 2026-04-16 21:49 by 学员JpLReM
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 310求调剂 +16 666真好 2026-04-11 18/900 2026-04-15 13:28 by 黑科技矿业
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 复试调剂 +21 积极向上; 2026-04-10 23/1150 2026-04-15 12:50 by 西北望—风沙
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 农学0904 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-11 4/200 2026-04-14 09:10 by zs92450
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂 5+5 chenny174 2026-04-10 37/1850 2026-04-14 07:39 by Abskk
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 材料工程日语考生求调剂 +7 0856?调剂 2026-04-10 7/350 2026-04-11 21:33 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
信息提示
请填处理意见