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关于蛋白纯化问题
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ganluren001
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注册: 2013-09-30
专业: 蛋白质组学
[
求助
]
关于蛋白纯化问题
现在做一种蛋白的粗纯,,样品的目的蛋白纯度比较低,,只有20%,,,用的是反相填料,,用异丙醇梯度洗脱的,,出主峰时峰形还挺对称的,,但是纯度最高的出现在了峰的下降阶段,,而且纯度最高只有77%,,求问原因及有什么方法解决
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【求助/交流】求助关于蛋白纯化的问题!
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1楼
2013-10-15 21:07:46
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yi_wang
铁杆木虫
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roye
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专业: 药物化学
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在制备的时候多细分几个瓶子,这样就能尽可能地多接收到比较纯的样品。
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哥泡的不是论坛,是寂寞....
4楼
2013-10-17 13:44:31
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biowf
银虫
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专业: 生物化学
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2013-10-17 18:08:16
这个很正常的,在收集主峰的时候,不要嫌麻烦,多分几瓶收集,分别测纯度。如果你样品量足够的话,也可以用你收集的纯度70%多的洗脱液处理一下,再过一次你的反相填料再看看。
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2楼
2013-10-16 08:41:55
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碧水寒鸭
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虫号: 1989895
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性别: GG
专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
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你分部收集就可以啦
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3楼
2013-10-17 12:52:09
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ganluren001
新虫
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虫号: 2692005
注册: 2013-09-30
专业: 蛋白质组学
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2楼
:
Originally posted by
biowf
at 2013-10-16 08:41:55
这个很正常的,在收集主峰的时候,不要嫌麻烦,多分几瓶收集,分别测纯度。如果你样品量足够的话,也可以用你收集的纯度70%多的洗脱液处理一下,再过一次你的反相填料再看看。
我分瓶收集已经够细了,,,有考虑在上一次柱子,,
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5楼
2013-10-17 18:10:18
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