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ganluren001

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白纯化问题

现在做一种蛋白的粗纯,,样品的目的蛋白纯度比较低,,只有20%,,,用的是反相填料,,用异丙醇梯度洗脱的,,出主峰时峰形还挺对称的,,但是纯度最高的出现在了峰的下降阶段,,而且纯度最高只有77%,,求问原因及有什么方法解决
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ganluren001

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biowf at 2013-10-16 08:41:55
这个很正常的,在收集主峰的时候,不要嫌麻烦,多分几瓶收集,分别测纯度。如果你样品量足够的话,也可以用你收集的纯度70%多的洗脱液处理一下,再过一次你的反相填料再看看。

我分瓶收集已经够细了,,,有考虑在上一次柱子,,
5楼2013-10-17 18:10:18
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biowf

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ganluren001: 金币+2, 有帮助 2013-10-17 18:08:16
这个很正常的,在收集主峰的时候,不要嫌麻烦,多分几瓶收集,分别测纯度。如果你样品量足够的话,也可以用你收集的纯度70%多的洗脱液处理一下,再过一次你的反相填料再看看。
2楼2013-10-16 08:41:55
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碧水寒鸭

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你分部收集就可以啦
3楼2013-10-17 12:52:09
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在制备的时候多细分几个瓶子,这样就能尽可能地多接收到比较纯的样品。
哥泡的不是论坛,是寂寞....
4楼2013-10-17 13:44:31
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