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s24512453

新虫 (初入文坛)

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[求助] 蓝白斑筛选的困惑

今天挑取了一个篮斑，五个白斑，做pcr，白斑有几个出现了目的条带，最诡异的是蓝斑也出现了目的条带，这是怎么个情况啊

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1楼 2013-10-14 21:45:54

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-15 10:26:28

PCR体系污染或者挑去菌斑是不是单克隆。是否用空载体做了PCR对照？

2楼2013-10-14 22:21:13

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ONLYRACHEL

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-22 16:52:16

蓝斑有时候可能会是目标产物，蓝白斑筛选应该是插入片段破坏了载体自身的读码框，如果片段不大，或者片段插入未能改变读码框，就很有可能出现蓝色阳性克隆。

3楼2013-11-22 16:43:13

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肥猫p

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【答案】应助回帖

可能目的片段碱基数是3的倍数吧

4楼2013-11-22 22:13:45

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