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一苇杭之xmc

银虫 (初入文坛)

[求助] 沉淀后的蛋白质怎样溶解?

沉淀后的蛋白是固体小球状的,想要后续跑SDS-PAGE,如果不用裂解液的话要怎样重新溶解呢?最好不用稀释的太厉害哦,求各位大神指点~
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新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2013-10-10 10:41:53
一苇杭之xmc: 金币+2, 有帮助 2013-10-29 22:22:46
先将你的样品混合均匀,
取1ml样品,离心10min,
取离心后上清,置另外一支EP管中,记为离心后上清样品,
往沉淀中加入1ml 8M 尿素溶液,用枪吹匀,溶解沉淀,计为离心后沉淀样品,
分别将是上面两个样品,制样,跑SDS-PAGE,即可知道你的样品中那一部分蛋白沉淀了。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-10-10 10:26:34
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zytsn

铁虫 (初入文坛)

我也遇到同样的问题,从叶片中提取的蛋白质,用的是TCA方法提取的,但是提出来,不知道用什么溶解后,去测浓度,不知道您是什么搞定的
不是看到希望才去坚持,而是坚持了才看到希望!
3楼2013-12-07 18:15:07
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一苇杭之xmc

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zytsn at 2013-12-07 18:15:07
我也遇到同样的问题,从叶片中提取的蛋白质,用的是TCA方法提取的,但是提出来,不知道用什么溶解后,去测浓度,不知道您是什么搞定的

如果不影响后续的话5%的sds就可以~不影响电泳。
欲速则不达
4楼2013-12-09 15:35:59
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