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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 沉淀后的蛋白质怎样溶解？
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一苇杭之xmc

银虫 (初入文坛)

[求助] 沉淀后的蛋白质怎样溶解？

沉淀后的蛋白是固体小球状的，想要后续跑SDS-PAGE，如果不用裂解液的话要怎样重新溶解呢？最好不用稀释的太厉害哦，求各位大神指点~
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欲速则不达
1楼 2013-10-09 16:08:48
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2013-10-10 10:41:53
一苇杭之xmc: 金币+2, ★有帮助 2013-10-29 22:22:46
先将你的样品混合均匀，
取1ml样品，离心10min，
取离心后上清，置另外一支EP管中，记为离心后上清样品，
往沉淀中加入1ml 8M 尿素溶液，用枪吹匀，溶解沉淀，计为离心后沉淀样品，
分别将是上面两个样品，制样，跑SDS-PAGE，即可知道你的样品中那一部分蛋白沉淀了。
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曾子曰：“士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎？死而后已，不亦远乎？”
2楼2013-10-10 10:26:34
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zytsn

铁虫 (初入文坛)
我也遇到同样的问题，从叶片中提取的蛋白质，用的是TCA方法提取的，但是提出来，不知道用什么溶解后，去测浓度，不知道您是什么搞定的
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不是看到希望才去坚持，而是坚持了才看到希望！
3楼2013-12-07 18:15:07
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一苇杭之xmc

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zytsn at 2013-12-07 18:15:07
我也遇到同样的问题，从叶片中提取的蛋白质，用的是TCA方法提取的，但是提出来，不知道用什么溶解后，去测浓度，不知道您是什么搞定的

如果不影响后续的话5%的sds就可以~不影响电泳。
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欲速则不达
4楼2013-12-09 15:35:59
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