应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于pcr的几个问题，请教大家，先谢谢了！
41/1返回列表
查看: 869  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

candy845

木虫 (正式写手)

[求助] 关于pcr的几个问题，请教大家，先谢谢了！

我投的一篇文章外审意见回来了，实验中涉及到用realtime pcr 检测几个基因的相对定量变化，用ddct的方法，内参是GAPDH，编辑给了如下的意见：
1. There is no mention of any assessment of RNA quality, either of its integrity or purity (ie the absence of inhibition). 2. Furthermore, agains all well-published evidence, the authors use a single, unvalidated reference gene to normalise, showing quite marginal differences in mRNA levels in Figure 3. There is a huge body of literature that shows very clearly that this kind of analysis is misleading and inappropriate.
4. it has also been well-known since 1998, when ABI published the details of the DDCq method, that the PCR efficiencies of both genes of interest and reference genes must be known, as otherwise this method of analysis is invalid.

问题1是因为我怕文字太多而没写；
之后的问题就不懂了，我用的GAPDH在以往的研究中很常用啊？还有问题3也搞不懂了。问题4是要测扩增效率么？
请高手不吝赐教！谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-08 19:13:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DAX1

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-10-08 21:33:14
楼主你这投的是什么杂志，怎么竟然有这样的要求。实在太奇怪了。你总不能把你提出的RNA的OD值放在文章上吧，建议楼主可以搞个只给REVIEWER看。如果楼主做的是老鼠或者人的细胞，GAPDH肯定没问题啊，你可以ARGUE，当然同时你也做个ACTIN作对照的，这样既显示你的没问题，也显示你听从了他的意见。问题4应该就是扩增效率，仪器一般会给出吧。
总结出来，不知道楼主发的文章是不是检测pcr效率的，如果是一般的细胞分子生物学实验，这个REVIEWER的意见实在是不能理解。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-10-08 20:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

candy845

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by DAX1 at 2013-10-08 20:30:47
楼主你这投的是什么杂志，怎么竟然有这样的要求。实在太奇怪了。你总不能把你提出的RNA的OD值放在文章上吧，建议楼主可以搞个只给REVIEWER看。如果楼主做的是老鼠或者人的细胞，GAPDH肯定没问题啊，你可以ARGUE，当 ...

是啊，我就是做的一般的生物学检测，用的小鼠的成骨细胞，方法什么的都是参照之前的文献，不知道为什么编辑会这么说，谢谢你的建议，准备完善pcr这段后解释一下。谢谢！
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-09 15:46:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DAX1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by candy845 at 2013-10-09 15:46:22
是啊，我就是做的一般的生物学检测，用的小鼠的成骨细胞，方法什么的都是参照之前的文献，不知道为什么编辑会这么说，谢谢你的建议，准备完善pcr这段后解释一下。谢谢！...

可能他也是没问题，然后就找点问题问问。这样挺好，至少没有叫你做啥高级的实验。祝好运
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-10-09 16:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 candy845 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295复试调剂 +7 简木ChuFront 2026-03-19 7/350 2026-03-20 14:11 by 星空星月
[考研] 329求调剂 +6 想上学吖吖 2026-03-19 6/300 2026-03-20 09:00 by 每天只摆一小会
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 生物学调剂招人！！！ +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +11 yangfz 2026-03-17 11/550 2026-03-19 15:06 by houyaoxu
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 化学求调剂 +3 临泽境llllll 2026-03-17 4/200 2026-03-19 13:59 by houyaoxu
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭