| 查看: 1183 | 回复: 3 | |||
candy845木虫 (正式写手)
|
[求助]
关于pcr的几个问题，请教大家，先谢谢了！
|
|
我投的一篇文章外审意见回来了，实验中涉及到用realtime pcr 检测几个基因的相对定量变化，用ddct的方法，内参是GAPDH，编辑给了如下的意见： 1. There is no mention of any assessment of RNA quality, either of its integrity or purity (ie the absence of inhibition). 2. Furthermore, agains all well-published evidence, the authors use a single, unvalidated reference gene to normalise, showing quite marginal differences in mRNA levels in Figure 3. There is a huge body of literature that shows very clearly that this kind of analysis is misleading and inappropriate. 4. it has also been well-known since 1998, when ABI published the details of the DDCq method, that the PCR efficiencies of both genes of interest and reference genes must be known, as otherwise this method of analysis is invalid. 问题1是因为我怕文字太多而没写； 之后的问题就不懂了，我用的GAPDH在以往的研究中很常用啊？还有问题3也搞不懂了。问题4是要测扩增效率么？ 请高手不吝赐教！谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有251人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于PCR和PAGE胶
已经有8人回复
- 求助各位大神--关于PCR的问题
已经有9人回复
- PCR小白，请教个关于NCBI的问题
已经有5人回复
- RT-PCR实验操作过程中遇到的问题
已经有15人回复
- 有关RT-PCR，请教有经验的虫友！先谢了！
已经有5人回复
- 荧光定量PCR，是相对定量相关问题请教。
已经有4人回复
- 一个关于qPCR标准曲线的问题。谢谢！
已经有12人回复
- 关于PCR中buffer的更换问题
已经有7人回复
- 请问有谁在用comsol4.2，小弟请教些问题，谢谢
已经有9人回复
- 反转录之后PCR扩增片段问题的请教，急急急
已经有5人回复
- 请教关于转子流量计与压强相关的问题，请大家帮帮忙，谢谢
已经有3人回复
- 做了几次PCR CT值都有变化怎么办？谢谢大家！！
已经有19人回复
- 做了几次PCR CT值都有变化怎么办？谢谢大家！！
已经有3人回复
- PCR产物凝胶回收、酶切等问题请教
已经有7人回复
- 请教一下pcr扩出的这到底对不对啊?
已经有11人回复
- 请教RTPCR。。
已经有4人回复
- 两个基因序列能不能做荧光定量PCR？请教大家一下！！！
已经有4人回复
- 请教各位前辈 为什么我做菌落PCR总也P不出来
已经有28人回复
- 请教real time pcr问题，谢谢！
已经有10人回复
- PCR后凝胶电泳条带时有时无是怎么回事？
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教个关于inverse PCR的问题
已经有21人回复
- 【求助/交流】关于pcr内参b-actine的一个问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】PCR产物连接请教！
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教各位一个定量PCR引物设计的问题，谢谢啦
已经有3人回复
- 【求助/交流】关于PCR的问题
已经有18人回复
2楼2013-10-08 20:30:47
candy845
木虫 (正式写手)
- 应助: 41 (小学生)
- 金币: 2919.5
- 散金: 552
- 红花: 2
- 帖子: 633
- 在线: 273.3小时
- 虫号: 899714
- 注册: 2009-11-10
- 性别: GG
- 专业: 金属材料的磨损与磨蚀
3楼2013-10-09 15:46:22
4楼2013-10-09 16:13:52
200
