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蛀虫英

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切问题,跪求指导啊

各位大牛,谁来帮帮我啊,我最近做双酶切,目的片段500左右,连载pmd18-simple-t载体上,用的是NEB公司的not1和bamh1两个酶进行酶切,测序序列正确,可是not1就是切不动,not1我已经验证过了好用,什么单切,过夜切,都试过了,我用的是20ul体系酶各加0.5,单切10ul,20ul都用过了,。。。神了啊,这种情况我改怎么办啊
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