| 查看: 2296 | 回复: 7 | ||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
重组质粒酶切验证没有目的条带
|
||
|
在构建慢病毒表达载体时，摇完菌提质粒酶切。在进行第二次酶切后，插入的目的条带电泳没有显示。这是为什么呢 本人构建完后提质粒先进行PCR验证过，扩增出了目的条带大小的片段，在第一步酶切时，电泳显示条带大小在10,000bp附近（我的载体为7.8kb, insert 为2250p）。后来分别用两个酶酶切后，大小也对。 我该如何解决第二部酶切的问题。 个人设想的是： 分别酶切+单酶切酶切产物PCR+重组质粒PCR+两步酶切后产物PCR=质粒构建成功。 不知可以不 |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂
已经有8人回复
-
0703化学调剂
已经有3人回复
-
材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦
已经有9人回复
-
一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂
已经有3人回复
-
280求调剂
已经有4人回复
-
0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历
已经有9人回复
-
工科材料085601 279求调剂
已经有6人回复
-
070300化学319求调剂
已经有5人回复
-
生物学071000 329分求调剂
已经有3人回复
-
0703化学调剂
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提取重组质粒进行双酶切之后什么条带也没有，怎么回事？？
已经有7人回复
- 质粒双酶切。。。。。。。
已经有5人回复
- 我构建质粒后酶切验证的问题
已经有13人回复
- 双酶切后目的条带的疑问？
已经有8人回复
- 求助关于双酶切空载跑胶没有条带！
已经有15人回复
- 求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
已经有7人回复
- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 酶切以后没有条带
已经有22人回复
- 质粒双酶切问题
已经有16人回复
- 重组质粒双酶切问题
已经有5人回复
- 我酶切质粒后，电泳显示没有切开，是不是因为酶在外面放的时间长了？
已经有9人回复
- 质粒酶切后消失了
已经有11人回复
- 质粒DNA用EcoR1和HindⅢ双酶切后电泳图，求鉴
已经有6人回复
- ppic9k质粒双酶切
已经有9人回复
- 双酶切切出了5条条带
已经有9人回复
- 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
已经有18人回复
- 【求助/交流】酶切后无任何条带是什么原因？
已经有8人回复
- 双酶切后目的条带下出现多个条带的原因
已经有9人回复
- 【求助/交流】双酶切质粒后，目的条带浅且前方有模糊亮带
已经有12人回复
5楼2013-10-08 14:03:29
bioxixi
木虫 (著名写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2254.6
- 散金: 55
- 红花: 1
- 帖子: 1080
- 在线: 89.5小时
- 虫号: 662656
- 注册: 2008-11-26
- 性别: MM
- 专业: 细胞生物学
2楼2013-10-08 09:01:09
3楼2013-10-08 12:43:36
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10638.6
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3702
- 在线: 790.1小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
4楼2013-10-08 13:44:14
50