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wei_suzhen新虫 (小有名气)
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[求助]
酶活测定方法
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试剂用量/μL 测定管 对照管 粗酶液 30 30 硫酸铵标准液 0 0 无氨蒸馏水 2300 2300 天门冬酰胺 200 0 混匀，置37℃水浴30min 天门冬酰胺 0 200 水杨酸溶液 1200 1200 次氯酸钠溶液 100 100 这个的酶在国内外没有研究的，所以不知道怎么测酶活。酶活测定的原理是：酶和底物反应后产生氨，用氨与水杨酸、次氯酸钠在碱性条件下反应生成靛酚蓝，根据颜色深浅，比色定量,在650nm处测定吸光度，进而推算天门冬酰胺酶的活力。用此方法测酶活，是不是需要终止酶反应然后再加显色剂，显色反应30min? 或者有更好的测定方法吗？ 一般高温终止酶反应需要多高的温度？多长时间？如果100度，20min能使酶失活吗？ |
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2楼2013-09-22 13:19:19
