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liushang1990

木虫 (小有名气)

[交流] western blot结果求解释

western结果求解释，本人用Abzoom品牌E2F1的试用装抗体（实验室仅此一支），是兔多抗。下面一排条带是beta actin。上面一排条带分子量比130KD大一点。但是E2F1分子量是70KD，在那附近却没有带。有人说有些抗体在130KD附近有杂带，但是为什么上样量差不多，杂带却不一样呢？（三条泳道，第一条上的是NC组，第二和第三上的是转染了不同量的质粒。）以前用其他的蛋白样，同样的抗体，130KD附近的条带差不多大。如果有比较满意的结果，追加小红花，谢谢！
western blot结果求解释
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1楼 2013-08-11 18:40:41
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
27楼: Originally posted by liushang1990 at 2013-08-13 16:44:45
谢谢！呃，这个抗体就那里有条带，其它地方很干净，好几次都这样。所谓样品问题，我用的都是H23细胞的裂解液跑的，所以感觉也不像。...

如果你有目标蛋白基因缺失的突变株，可以与样品同时跑，如果突变株里也有这条带，肯定是杂带。同理，用纯化的目标蛋白作为阳性对照，如果这条带不出现在阳性对照里面的话就是杂带了。
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29楼2013-08-13 20:37:41
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liushang1990

木虫 (小有名气)
如果是一种蛋白，那么分子量130KD的蛋白可能是那些呢？
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2楼2013-08-11 18:43:39
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沧__海4楼
2013-08-11 18:57   回复  
liushang1990(金币+1): 谢谢参与
， [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
liushang199013楼
2013-08-11 20:20   回复  
引用回帖:
3楼: Originally posted by buzhaohu at 2013-08-11 18:49:33 h

liushang199014楼
2013-08-11 20:20   回复  
引用回帖:
4楼: Originally posted by 沧__海 at 2013-08-11 18:57:38 ，

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