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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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蛋炒饭1989

金虫 (小有名气)

[求助] 原核表达蛋白时标签无论在N端还是C端蛋白折叠时都被折进去了,怎么办

各位虫虫好,我最近在做原核表达蛋白,用的标签是HIS-tag,发现标签无论是在N端还是在C端,蛋白折叠时都把它折进去了,纯化不了。我现在想的是是不是可以让蛋白什么标签都不带,按分子量去分。我的方向本来是电化学的,分子方面的很多都不懂,下一步不知道肿么办,求虫虫指点。
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春暖花开
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roomofxw

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流! 2013-07-31 18:50:48
蛋炒饭1989: 金币+4 2013-08-01 20:27:13
蛋炒饭1989: 金币+4 2013-08-01 20:27:33
跑一下HIC,简单点的话跑一下非变形电泳,看看分子量是不是单体
说不定形成的是可溶性聚集体,介于包涵体沉淀和可溶蛋白之间的东西
6楼2013-07-31 14:34:03
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bleach060452

新虫 (小有名气)

★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流! 2013-07-31 18:50:41
看你蛋白用来干啥了,要不要活性?

至于蛋白的分离纯化,这也不属于分子生物学的~~想用其他方法纯化,那就需要看你蛋白的特性、杂蛋白的影响了
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-07-31 11:43:14
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欧阳-90

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
蛋炒饭1989: 金币+3 2013-08-01 20:27:42
我不是很懂呀,你的折叠进去后蛋白是上清中表达还是包涵体形式?而且如果不需要活性的话,你是不是可以让蛋白变性舒展开呢?
3楼2013-07-31 12:10:54
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蛋炒饭1989

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 欧阳-90 at 2013-07-31 12:10:54
我不是很懂呀,你的折叠进去后蛋白是上清中表达还是包涵体形式?而且如果不需要活性的话,你是不是可以让蛋白变性舒展开呢?

是在上清中,我的蛋白需要活性
春暖花开
4楼2013-07-31 12:26:37
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