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sweetbobo

银虫 (小有名气)


[交流] 请问原核细菌蛋白能否在真核细胞中表达?

如题
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可以,只要只要接上真核细胞的启动子并且形成正确的开放阅读框就行。
2楼2013-05-06 17:26:53
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sweetbobo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-06 17:26:53
可以,只要只要接上真核细胞的启动子并且形成正确的开放阅读框就行。

嗯,启动子和ORF没有问题,但是不表达,请问您有表达成功的案例吗?谢谢!
3楼2013-05-06 17:55:51
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★ ★ ★ ★ ★ ★
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sweetbobo: 金币+5 2013-05-07 10:29:52
你要是在ORF加上强启动子哪,比如加上enhancer。另外去除ORF的内含子切除标志,以免被RNA splicing.
4楼2013-05-06 18:10:29
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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-06 18:10:29
你要是在ORF加上强启动子哪,比如加上enhancer。另外去除ORF的内含子切除标志,以免被RNA splicing.

个人有个疑惑,这个原核基因在真核表达,由于原核、真核生物有各自不容的蛋白折叠系统,者表达出来的东西,跟原核表达出来的具有相同的生物学特征么?
5楼2013-05-07 09:08:11
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sweetbobo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by cory0931 at 2013-05-07 09:08:11
个人有个疑惑,这个原核基因在真核表达,由于原核、真核生物有各自不容的蛋白折叠系统,者表达出来的东西,跟原核表达出来的具有相同的生物学特征么?...

一般来说,真核的蛋白能够在原核系统中表达,可能缺少一定的修饰,但有时是够用的,反过来原核在真核细胞中表达,把一个原本简单的事情复杂化后,估计问题就多了些!
6楼2013-05-07 10:25:41
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sweetbobo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-06 18:10:29
你要是在ORF加上强启动子哪,比如加上enhancer。另外去除ORF的内含子切除标志,以免被RNA splicing.

我用的质粒是原实验室常用来真核蛋白表达的,启动子可能没问题,你提到的RNA剪切,我不太懂,稍微查了下,貌似很复杂,请问内含子标识序列有哪些?
7楼2013-05-07 10:29:09
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引用回帖:
7楼: Originally posted by sweetbobo at 2013-05-07 10:29:09
我用的质粒是原实验室常用来真核蛋白表达的,启动子可能没问题,你提到的RNA剪切,我不太懂,稍微查了下,貌似很复杂,请问内含子标识序列有哪些?...

请自行查阅分子生物学教材。
8楼2013-05-07 12:20:27
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MarchZR

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哈哈,楼上的回复太好笑了,可以用真核表达,小量的用细胞瞬转就可以
9楼2015-09-29 10:35:14
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