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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问原核细菌蛋白能否在真核细胞中表达？
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sweetbobo

银虫 (小有名气)

[交流] 请问原核细菌蛋白能否在真核细胞中表达？

如题
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1楼 2013-05-06 16:59:08
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
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可以，只要只要接上真核细胞的启动子并且形成正确的开放阅读框就行。
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2楼2013-05-06 17:26:53
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sweetbobo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-06 17:26:53
可以，只要只要接上真核细胞的启动子并且形成正确的开放阅读框就行。

嗯，启动子和ORF没有问题，但是不表达，请问您有表达成功的案例吗？谢谢！
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3楼2013-05-06 17:55:51
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
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sweetbobo: 金币+5 2013-05-07 10:29:52
你要是在ORF加上强启动子哪，比如加上enhancer。另外去除ORF的内含子切除标志，以免被RNA splicing.
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4楼2013-05-06 18:10:29
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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)
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4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-06 18:10:29
你要是在ORF加上强启动子哪，比如加上enhancer。另外去除ORF的内含子切除标志，以免被RNA splicing.

个人有个疑惑，这个原核基因在真核表达，由于原核、真核生物有各自不容的蛋白折叠系统，者表达出来的东西，跟原核表达出来的具有相同的生物学特征么？
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5楼2013-05-07 09:08:11
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sweetbobo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cory0931 at 2013-05-07 09:08:11
个人有个疑惑，这个原核基因在真核表达，由于原核、真核生物有各自不容的蛋白折叠系统，者表达出来的东西，跟原核表达出来的具有相同的生物学特征么？...

一般来说，真核的蛋白能够在原核系统中表达，可能缺少一定的修饰，但有时是够用的，反过来原核在真核细胞中表达，把一个原本简单的事情复杂化后，估计问题就多了些！
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6楼2013-05-07 10:25:41
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sweetbobo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-06 18:10:29
你要是在ORF加上强启动子哪，比如加上enhancer。另外去除ORF的内含子切除标志，以免被RNA splicing.

我用的质粒是原实验室常用来真核蛋白表达的，启动子可能没问题，你提到的RNA剪切，我不太懂，稍微查了下，貌似很复杂，请问内含子标识序列有哪些？
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7楼2013-05-07 10:29:09
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
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引用回帖:
7楼: Originally posted by sweetbobo at 2013-05-07 10:29:09
我用的质粒是原实验室常用来真核蛋白表达的，启动子可能没问题，你提到的RNA剪切，我不太懂，稍微查了下，貌似很复杂，请问内含子标识序列有哪些？...

请自行查阅分子生物学教材。
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8楼2013-05-07 12:20:27
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MarchZR

银虫 (小有名气)
★
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哈哈，楼上的回复太好笑了，可以用真核表达，小量的用细胞瞬转就可以
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9楼2015-09-29 10:35:14
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