[求助] 原核表达蛋白时标签无论在N端还是C端蛋白折叠时都被折进去了，怎么办

各位虫虫好，我最近在做原核表达蛋白，用的标签是HIS-tag，发现标签无论是在N端还是在C端，蛋白折叠时都把它折进去了，纯化不了。我现在想的是是不是可以让蛋白什么标签都不带，按分子量去分。我的方向本来是电化学的，分子方面的很多都不懂，下一步不知道肿么办，求虫虫指点。

春暖花开

1楼 2013-07-31 11:04:14

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银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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蛋炒饭1989: 金币+3 2013-08-01 20:27:42

我不是很懂呀，你的折叠进去后蛋白是上清中表达还是包涵体形式？而且如果不需要活性的话，你是不是可以让蛋白变性舒展开呢？

3楼2013-07-31 12:10:54

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银虫 (小有名气)

引用回帖:

4楼: Originally posted by 蛋炒饭1989 at 2013-07-31 12:26:37
是在上清中，我的蛋白需要活性...

标签纯化不是唯一的方法，就算是原核重组蛋白，同样我们可以考虑使用其他方法纯化，比如初步硫酸铵沉淀，结合其他的层析方法进行纯化。只是你可能需要摸索的时间会多一点

11楼2013-08-01 09:06:20

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