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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重组酵母表达问题
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doughtiness

新虫 (小有名气)

[交流] 重组酵母表达问题 已有1人参与

各位同胞，请问大家个问题。一个重组质粒insert/pPICZαA转入酵母感受态GS115或者X33，请问重组质粒中的目的基因若要在酵母中表达并且仍然保持有催化活性，目的基因、载体与酵母感受态三者之间应该满足的条件是什么呢？
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1楼 2013-07-24 15:53:33
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飞扬~~~

新虫 (小有名气)
有同源序列啊
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2楼2013-07-24 18:07:59
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doughtiness

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞扬~~~ at 2013-07-24 18:07:59
有同源序列啊

不是很明白啊，谁与谁之间的同源序列呢？
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3楼2013-07-25 10:35:45
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飞扬~~~

新虫 (小有名气)
★
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你是把质粒转进酵母里吗？是质粒与酵母染色体有同源序列
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4楼2013-07-25 15:35:13
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doughtiness

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞扬~~~ at 2013-07-25 15:35:13
你是把质粒转进酵母里吗？是质粒与酵母染色体有同源序列

恩，质粒跟酵母染色体是有同源性的。现在已经成功构建了原核生物中的目的基因与真核表达载体pPICZαA的重组质粒insert/pPICZαA，并且已经成功转入了酵母感受态GS115或者X33。由于真核生物表达系统与原核表达系统不同，所以我就不知道会不会表达，更不知道表达出来的酶是否有活性，实验还在进行中，所以提前问下各位大侠酵母的表达机理
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5楼2013-07-25 15:49:05
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飞扬~~~

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by doughtiness at 2013-07-25 15:49:05
恩，质粒跟酵母染色体是有同源性的。现在已经成功构建了原核生物中的目的基因与真核表达载体pPICZαA的重组质粒insert/pPICZαA，并且已经成功转入了酵母感受态GS115或者X33。由于真核生物表达系统与原核表达系统不 ...

你的目的基因是干什么的，然后在设计实验啊
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6楼2013-07-25 21:07:37
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