24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2962  |  回复: 26

麦堂straw

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质糖基化位点鉴定

在毕赤酵母中新表达一个重组蛋白,已确定其发生了糖基化现象,现想对其进行糖基化位点的鉴定,主要想通过胶内酶解——肽段富集——质谱分析——数据库检索等系列流程,问一下小木虫的各位大侠,有没有做过相关的工作,在国内一般哪个公司或研究机构做的比较好收费便宜?
谢谢各位!
回复此楼
山有木兮木有枝,心悦君兮君不知。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

今天就到这里,御姐我今天下午还要去拜访几位重要的客人;楼主愿意与我继续讨论,可以贴出来,不愿意就算了。GOOD LUCK!
9楼2013-04-20 15:01:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
麦堂straw: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-04-20 18:36:23
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-22 08:55:40
内容已删除
2楼2013-04-20 11:47:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

更正:“那里设备是MALDI-MS”,我是提笔忘字,
3楼2013-04-20 12:00:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

内容已删除
4楼2013-04-20 12:11:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

麦堂straw

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-04-20 11:47:59
质谱鉴定可以比较容易地检测糖基化。你可以找北京大学中心实验楼质谱室,在北京大学医学部2楼,那里设备是MADI-MS,精度还可以收费可能是北京地区最低的,及对北京大学内部服务也对北京大学之外服务。北京大学生物医 ...

感谢回复!可是要分析糖基化位点,貌似是要做肽段谱图,需十分精确,我查询到的公司一般用的都是nano-LC-MS/MS,为纳升级别的,且还需去糖基化酶进行去糖基化。请问你知道具体情况,能做这个吗?
山有木兮木有枝,心悦君兮君不知。
5楼2013-04-20 12:32:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 哇菇凉哈哈。赠人玫瑰手有余香 2013-04-22 18:46:12
MALDI-MS可以完成多肽的糖基化、磷酸化、甲基化、乙酰化等各种共价的修饰。具体样品准备你可以和有关实验室和检测中心协商。肽段谱图一般用胰蛋白酶有限水解蛋白质即可,因为肽分子量过大质谱无法精确检测出分子量,到用软件找匹配时结果不唯一。不过糖基的分支点肯定无法直接由MALDI-MS可以测出,必须在样品准备时使用不同的糖基酶有限水解后用MALDI-MS测定后拼装。
6楼2013-04-20 12:41:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 麦堂straw at 2013-04-20 12:32:02
感谢回复!可是要分析糖基化位点,貌似是要做肽段谱图,需十分精确,我查询到的公司一般用的都是nano-LC-MS/MS,为纳升级别的,且还需去糖基化酶进行去糖基化。请问你知道具体情况,能做这个吗?...

“要分析糖基化位点,貌似是要做肽段谱图,需十分精确。"不是貌似肽段谱图,而是貌似Ladder Sequencing,即Ediman降解结合质谱测定多肽序列,也就是用质谱代替凝胶电泳测定每一步Ediman降解之后减少一个氨基酸残基分子量的多肽段的相对分子量,但是现在能够用串联质谱直接测定多肽段的氨基酸序列了,不用在结合用Ediman降解。而且许多的多肽的糖基化、磷酸化、甲基化、乙酰化等各种共价的修饰,尤其是磷酸化修饰已经能够直接从质谱读出。但是不幸的是糖分子不是线性分子,而是可能有很多分支。至少在分支位点必须用糖苷酶水解以确定分支的类型,目前的质谱还打不到能够区别糖链不同分支的水平。
7楼2013-04-20 13:42:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

MMB 446 Post-Translational Modifications of Proteins, 2009,2nd Ed,
楼主参考一下了,有具体问题我们还可以自讨论.

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 446_Post-TranslationalModificationsofProteins,2ndEd.pdf
  • 2013-04-20 15:01:50, 10.09 M
8楼2013-04-20 14:55:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

麦堂straw

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-04-20 15:01:34
今天就到这里,御姐我今天下午还要去拜访几位重要的客人;楼主愿意与我继续讨论,可以贴出来,不愿意就算了。GOOD LUCK!

十分不好意思,刚一直做实验,没有及时回复。谢谢你提供的参考信息,我会认真阅读,我之前一直在做克隆,对蛋白修饰质谱分析方面完全是小白,不懂的地方还请多多指教,谢谢!
山有木兮木有枝,心悦君兮君不知。
10楼2013-04-20 18:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 麦堂straw 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +8 vants 2026-04-05 8/400 2026-04-06 06:17 by houyaoxu
[考研] 294求调剂 +4 Grey_Ey 2026-04-01 5/250 2026-04-05 23:05 by Grey_Ey
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 求调剂 +3 电气小神童 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:17 by barlinike
[考研] 一志愿电子科技大学085600材料与化工 329分求调剂 +10 Naiko 2026-04-04 10/500 2026-04-05 09:40 by sam3303
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +13 lllllos 2026-04-04 14/700 2026-04-04 23:34 by lqwchd
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 341求调剂 +3 洛多罗 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:36 by 智能智慧
[考研] 302求调剂一志愿华中师范大学 +8 小江小江江江 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:50 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +3 ffyyu 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:03 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 工科 267求调剂 +5 wanwan00 2026-04-02 7/350 2026-04-03 14:14 by zhangdingwa
[考研] 11408,284分,二战真诚求调剂 +4 12.27 2026-04-02 4/200 2026-04-03 14:14 by dxiaoxin
[考研] 材料考研调剂 +10 Gs大王 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:47 by 遗忘消失的灆
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突, 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:16 by 兔突突突,
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +6 1段时间 2026-03-31 7/350 2026-04-02 13:57 by 3041
[考研] 310分求调剂 +4 成功上岸wang 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:35 by liu823948201
[考研] 262求调剂 +9 励志一定发文章 2026-03-31 10/500 2026-04-01 12:22 by sunshine0013
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 本科211总分289,08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
信息提示
请填处理意见