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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » RNA提取260/230在1—1.5之间
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nonglong1

金虫 (正式写手)

[交流] RNA提取260/230在1—1.5之间 已有2人参与

现在遇到纠结的问题：
看到很多资料说是RNA提取的要求是260/280在1.9-2.1之间，260/230要大于2. 现在我提的RNA 浓度为140 ng/ul 左右，260/280符合要求，但是260/230在1—1.5之间，不知道这样的RNA可不可以用，接下来要做到是反转和荧光定量。谢谢!
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植物学
1楼 2013-07-22 19:19:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
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可以用。我觉得主要是样品浓度有点低，有少量有机试剂（如乙醇）干扰。
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2楼2013-07-23 00:44:55
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wxf-er

银虫 (正式写手)
★
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你提的什么材料，用什么方法提的呀，浓度太低了！测这些检测的是RNA的浓度和纯度，可能有蛋白没有去干净；另外还得跑电泳，查看RNA的完整性，这个对于做定量很重要。
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自然
3楼2013-07-23 19:14:31
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nonglong1

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wxf-er at 2013-07-23 19:14:31
你提的什么材料，用什么方法提的呀，浓度太低了！测这些检测的是RNA的浓度和纯度，可能有蛋白没有去干净；另外还得跑电泳，查看RNA的完整性，这个对于做定量很重要。

我用的是试剂盒提的植物材料，电泳条带还可以。其他基本上浓度都在500ng/uL左右，就是有几个比较低，而且260/230有点低。比较纠结这几个浓度低的，因为已经提的两遍了。
做反转的时候根据浓度多加些体积，保证相同的RNA的量不知道能不能行？
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植物学
4楼2013-07-25 00:22:33
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wxf-er

银虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
4楼: Originally posted by nonglong1 at 2013-07-25 00:22:33
我用的是试剂盒提的植物材料，电泳条带还可以。其他基本上浓度都在500ng/uL左右，就是有几个比较低，而且260/230有点低。比较纠结这几个浓度低的，因为已经提的两遍了。
做反转的时候根据浓度多加些体积，保证相同 ...

你测得OD反应不了RNA有没有降解，要跑电泳胶看有没有降解，降解了做不了定量！另外，提植物RNA的试剂盒有很多种，提了两边260/230还是那么低，要是排除你操作原因，那就是试剂盒原因了，说明你用的试剂盒不适用于你的植物材料！
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自然
5楼2013-07-25 12:10:37
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