应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 它怎么就反转录不出来，求教
51/1返回列表
查看: 1180  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

7788945

银虫 (小有名气)

[交流] 它怎么就反转录不出来，求教

提了几个RNA样品，电泳结果还不错，蛋白和DNA非常少，28S：18S也接近2：1，OD检测260/280都在1.95和2.00之间，260/230小了点，1.7左右，但是提了N次RNA，也反转了N次了，有的时候260/230连1.5都不到，反转录都没问题，这次就是反转不出来，哪位提个醒，反转录还有什么隐藏的敌人没抓出来

[ Last edited by wanhscn on 2011-9-15 at 08:47 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-14 22:12:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

博杰冲

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你用的试剂有没有换过啊？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-09-15 08:20:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

7788945

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 博杰冲 at 2011-09-15 08:20:12:
你用的试剂有没有换过啊？

木有啊，同一批的试剂
赞一下 回复此楼
3楼2011-09-16 17:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cloverplm

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+1): 很活跃啊 2011-09-17 08:37:56
试剂放久了失活也有可能的哦，你用同样的步骤再反转一次，温度和转录时间都和以前一致，换一批试剂试试，实在不行就只能怀疑RNA抽提了。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-09-16 22:43:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

7788945

银虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 欢迎把经验分享出来，鼓励重新开贴探讨 2011-09-19 07:49:54
引用回帖:
4楼: Originally posted by cloverplm at 2011-09-16 22:43:49:
试剂放久了失活也有可能的哦，你用同样的步骤再反转一次，温度和转录时间都和以前一致，换一批试剂试试，实在不行就只能怀疑RNA抽提了。

又重新提取了，应该是小分子的原因，反转录出来的260/230都大于1.8，低于1.8的有一个算一个，全不出，1.75的也不出。以前提完RNA反转录没这么苛刻
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-09-18 20:57:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 7788945 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭