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2009111028

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[交流] 【求助/交流】哪位好人告诉我小麦反转录的程序已有5人参与

寻求小麦反转录的程序

[ Last edited by 1949stone on 2011-3-3 at 15:46 ]

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1楼 2011-03-03 15:37:29

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holyala

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...哎，这位新虫友不如先去学习一下如何提问吧？

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2769987

你这问的是小麦逆转录转座子什么的，还是小麦RNA逆转录的实验操作啊？

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2楼2011-03-03 17:33:25

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2009111028

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呵呵，见笑了，我第一次做这方面的实验还不是很明白，是小麦RNA逆转录的程序设置，还请指教

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3楼2011-03-03 22:10:51

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reasonspare

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引用回帖:

Originally posted by 2009111028 at 2011-03-03 22:10:51:
呵呵，见笑了，我第一次做这方面的实验还不是很明白，是小麦RNA逆转录的程序设置，还请指教

哈哈，你第一次作这方面的实验不要紧。
可是你问题的问题的标题，就知道你不是“还不不是很明白”，是“根本都不明白”。
RNA 逆转录，不太区别小麦还是花生，所以你题目中强调小麦，虫友以为有所特指。

RNA逆转录根据生物来源不同：原核生物和真核生物有所不同。
RNA逆转录所以不管你是小麦还是花生，RNA提出来后，逆转录的程序都一样。

转录之前，检测RNA 的纯度，浓度，完整性；并RNase free DNase 处理到样品的DNA杂质.

转录的反映体系，根据你的选择的反转录酶有所差别，按照说明说就行。

RNA逆转录的程序设置同样根据试剂盒不同而有所差别。
1 RNA 变性 75C 5min,
2 迅速冰于3 min,
3 加入引物，冰浴
4 假如反应体系。
5 开始反转录。：通常是体系缓慢升值37，根据不同的酶有的是42C, 大概维持1小时就逆转录结束，70-75 5min将转录酶是活。

重点提醒，按照说明说做就行了。其它都是废话。

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