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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】哪位好人告诉我小麦反转录的程序
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2009111028

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】哪位好人告诉我小麦反转录的程序 已有5人参与

寻求小麦反转录的程序

[ Last edited by 1949stone on 2011-3-3 at 15:46 ]
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1楼 2011-03-03 15:37:29
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1): 谢谢分享。 2011-03-04 06:04:49
...哎，这位新虫友不如先去学习一下如何提问吧？

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2769987

你这问的是小麦逆转录转座子什么的，还是小麦RNA逆转录的实验操作啊？
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2楼2011-03-03 17:33:25
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2009111028

新虫 (初入文坛)
呵呵，见笑了，我第一次做这方面的实验还不是很明白，是小麦RNA逆转录的程序设置，还请指教
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3楼2011-03-03 22:10:51
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 2009111028 at 2011-03-03 22:10:51:
呵呵，见笑了，我第一次做这方面的实验还不是很明白，是小麦RNA逆转录的程序设置，还请指教

哈哈，你第一次作这方面的实验不要紧。
可是你问题的问题的标题，就知道你不是“还不不是很明白”，是“根本都不明白”。
RNA 逆转录，不太区别小麦还是花生，所以你题目中强调小麦，虫友以为有所特指。

RNA逆转录 根据生物来源不同：原核生物和真核生物有所不同。
RNA逆转录 所以不管你是小麦 还是花生，RNA提出来后，逆转录的程序都一样。

转录之前，检测RNA 的纯度，浓度，完整性；并RNase free DNase 处理到样品的DNA杂质.

转录的反映体系，根据你的选择的反转录酶有所差别，按照说明说就行。

RNA逆转录的程序设置同样根据试剂盒不同而有所差别。
1 RNA 变性 75C 5min,
2 迅速冰于3 min,
3 加入引物，冰浴
4 假如反应体系。
5 开始反转录。：通常是体系缓慢升值37， 根据不同的酶有的是42C, 大概维持1小时就逆转录结束，70-75 5min将转录酶是活。

重点提醒，按照说明说做就行了。其它都是废话。
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大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
4楼2011-03-04 06:17:38
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2009111028

新虫 (初入文坛)
呵呵，非常感谢指教，真是不懂的东西很多。还是要继续学习，呵呵
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5楼2011-03-05 13:27:46
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wansanlian

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 2009111028 at 2011-03-03 22:10:51:
呵呵，见笑了，我第一次做这方面的实验还不是很明白，是小麦RNA逆转录的程序设置，还请指教

直接用反转录试剂盒就可以了啊，按照说明书，现在有很多这种试剂盒，都还不错
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乱花渐欲迷人眼
6楼2012-03-03 16:44:34
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
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7楼2012-03-03 20:33:33
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