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【求助/交流】哪位好人告诉我小麦反转录的程序已有5人参与
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寻求小麦反转录的程序 [ Last edited by 1949stone on 2011-3-3 at 15:46 ] |
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3楼2011-03-03 22:10:51
holyala
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reasonspare(金币+1): 谢谢分享。 2011-03-04 06:04:49
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...哎，这位新虫友不如先去学习一下如何提问吧？ http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2769987 你这问的是小麦逆转录转座子什么的，还是小麦RNA逆转录的实验操作啊？ |
2楼2011-03-03 17:33:25
reasonspare
木虫 (著名写手)
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哈哈，你第一次作这方面的实验不要紧。 可是你问题的问题的标题，就知道你不是“还不不是很明白”，是“根本都不明白”。 RNA 逆转录，不太区别小麦还是花生，所以你题目中强调小麦，虫友以为有所特指。 RNA逆转录 根据生物来源不同：原核生物和真核生物有所不同。 RNA逆转录 所以不管你是小麦 还是花生，RNA提出来后，逆转录的程序都一样。 转录之前，检测RNA 的纯度，浓度，完整性；并RNase free DNase 处理到样品的DNA杂质. 转录的反映体系，根据你的选择的反转录酶有所差别，按照说明说就行。 RNA逆转录的程序设置同样根据试剂盒不同而有所差别。 1 RNA 变性 75C 5min, 2 迅速冰于3 min, 3 加入引物，冰浴 4 假如反应体系。 5 开始反转录。：通常是体系缓慢升值37， 根据不同的酶有的是42C, 大概维持1小时就逆转录结束，70-75 5min将转录酶是活。 重点提醒，按照说明说做就行了。其它都是废话。 |
4楼2011-03-04 06:17:38
5楼2011-03-05 13:27:46