24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2372  |  回复: 6

wawa_wang

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物根系RNA提取,260/230过低怎么办?

植株是种在石英砂里面的,取了根系的样品打算测序,但是现在已经练习很久了,还不能提出合格的RNA,260/230总是过低,一般为1.6-1.7,是在想不出办法了,希望各位大侠伸出援手。
另外还有个问题,加入氯仿后是剧烈振荡好,还是上下颠倒混匀乳化就行?我之前提的RNA,加入氯仿后,上下颠倒混匀至不分层,然后就静止,这样做抽提第二遍就看不见蛋白层了,测OD值时,260/280的数值基本上都在1.9-2.1之间。今天我提RNA的时候,师兄说要剧烈振荡一分钟,我照做了,然后抽提了五次才看不见蛋白层。请问这是为什么呢?
另外附一张RNA的电泳图,请大家帮我看看,提得怎么样。非常感谢!
拜托拜托

111.JPG



111.JPG



[ Last edited by wawa_wang on 2012-11-14 at 22:43 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我做RNA一般都以电泳图为准,只要三条带都有,比例也对就可以了。分光光度计测往往存在仪器是否校准的问题,差的不是很大就不用太在意。从电泳图上看感觉大部分样品都提的不错,可以继续试验了。楼主要RNA做什么?
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-11-15 22:00:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wawa_wang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-11-15 22:00:53
我做RNA一般都以电泳图为准,只要三条带都有,比例也对就可以了。分光光度计测往往存在仪器是否校准的问题,差的不是很大就不用太在意。从电泳图上看感觉大部分样品都提的不错,可以继续试验了。楼主要RNA做什么?

打算测表达谱的,你帮忙看看电泳图有DNA污染吗?
3楼2012-11-15 23:09:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wawa_wang at 2012-11-15 23:09:04
打算测表达谱的,你帮忙看看电泳图有DNA污染吗?...

我感觉都还行
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2012-11-16 00:38:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

光武故里

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从电泳情况看,提取的RNA总体质量还好,只是稍微有些DNA杂质(见28S条带上的条带);另外点样孔有些亮,疑是有蛋白杂质
5楼2012-11-17 12:40:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunzhengwang

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

剧烈震荡一分钟左右,然后200ul枪,分次抽提;
一手生存,一手梦想
6楼2013-02-28 10:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mazhq1988

金虫 (正式写手)

你这是用什么方法提取的呀?
爱人者,人恒爱之;敬人者,人恒敬之;助人者,人恒助之
7楼2013-09-21 13:36:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wawa_wang 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +8 Mr. Z 2026-04-05 8/400 2026-04-06 09:24 by dongzh2009
[考研] 085600,320分求调剂 +16 大馋小子 2026-04-04 17/850 2026-04-06 07:58 by MOF_Catal
[考研] 270求调剂 +9 小杰pp 2026-03-31 11/550 2026-04-05 11:02 by 风雨无晴
[考研] 283分求调剂 +9 试试看呗 2026-04-04 9/450 2026-04-05 10:27 by 果冻大王
[考研] 11408,335分,本科211,求调剂,可转专业 +5 鳄梨大鳄鱼 2026-04-03 5/250 2026-04-04 22:49 by chongya
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖! 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 求调剂 +4 压力??大 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:36 by 啵啵啵0119
[考研] 266求调剂 +18 阳阳哇塞 2026-04-01 18/900 2026-04-03 18:38 by zllcz
[考研] 266分,求材料相关专业调剂 +13 哇呼哼呼哼 2026-03-30 15/750 2026-04-03 15:24 by arrow8852
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 309求调剂 +14 呆菇不是戴夫 2026-04-02 14/700 2026-04-03 09:42 by 蓝云思雨
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-04-02 3/150 2026-04-03 08:44 by yulian1987
[考研] 362求调剂 +14 西南交材料专硕3 2026-03-31 14/700 2026-04-02 17:50 by yunlongyang
[考研] 354求调剂 +4 lxb598 2026-03-31 5/250 2026-04-02 09:55 by Jaylen.
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 材料专业调剂 +5 啦啦啦哭 2026-03-31 6/300 2026-04-01 16:48 by JourneyLucky
[考研] 0710生物学求调剂! +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
信息提示
请填处理意见