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wawa_wang

新虫 (初入文坛)

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[求助] 植物根系RNA提取，260/230过低怎么办？

植株是种在石英砂里面的，取了根系的样品打算测序，但是现在已经练习很久了，还不能提出合格的RNA，260/230总是过低，一般为1.6-1.7，是在想不出办法了，希望各位大侠伸出援手。
另外还有个问题，加入氯仿后是剧烈振荡好，还是上下颠倒混匀乳化就行？我之前提的RNA，加入氯仿后，上下颠倒混匀至不分层，然后就静止，这样做抽提第二遍就看不见蛋白层了，测OD值时，260/280的数值基本上都在1.9-2.1之间。今天我提RNA的时候，师兄说要剧烈振荡一分钟，我照做了，然后抽提了五次才看不见蛋白层。请问这是为什么呢？
另外附一张RNA的电泳图，请大家帮我看看，提得怎么样。非常感谢！
拜托拜托

111.JPG

111.JPG

[ Last edited by wawa_wang on 2012-11-14 at 22:43 ]

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1楼2012-11-14 22:19:15

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wawa_wang

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引用回帖:

2楼: Originally posted by starseacow at 2012-11-15 22:00:53
我做RNA一般都以电泳图为准，只要三条带都有，比例也对就可以了。分光光度计测往往存在仪器是否校准的问题，差的不是很大就不用太在意。从电泳图上看感觉大部分样品都提的不错，可以继续试验了。楼主要RNA做什么？

打算测表达谱的，你帮忙看看电泳图有DNA污染吗？