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damo8912

铜虫 (初入文坛)

[求助] 染色体步移求助

用的酶切加接头的两次PCR的方法，第一次PCR结果弥散，第二次PCR结果还是弥散。求助各位，在做步移的时候需要注意些什么。
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1楼 2013-07-16 06:56:08
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damo8912

铜虫 (初入文坛)
求助阿   做了好几遍了  好浪费钱啊
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2楼2013-07-21 15:07:07
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爱的天使13

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

那第三次的PCR结果怎么样啊？前两次弥散很正常啊
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3楼2013-07-21 15:54:09
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爱的天使13

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
damo8912(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-23 11:37:45
如果其他都正常，注意稀释倍数就可以啊
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4楼2013-07-21 15:55:53
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damo8912

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱的天使13 at 2013-07-21 15:54:09
那第三次的PCR结果怎么样啊？前两次弥散很正常啊

我是加接头那种 只有两次PCR啊
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5楼2013-07-22 15:38:18
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damo8912

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱的天使13 at 2013-07-21 15:55:53
如果其他都正常，注意稀释倍数就可以啊

请问一般稀释多少  我稀释到500都没出  一直可以稀释多少啊
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6楼2013-07-22 15:38:56
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爱的天使13

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
damo8912(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-07-23 11:37:58
我也是第一次做，我用的是一次普通PCR，两次Tail PCR,做的很顺利，测序也正确
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7楼2013-07-23 08:59:10
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爱的天使13

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-23 09:20:04
注意三点吧：加的体系（引物浓度要注意）
           PCR仪设定
           稀释倍数（多做几个稀释倍数呗）
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8楼2013-07-23 09:02:46
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偶尔--apple

铁虫 (初入文坛)
你好，请问你用clontech的试剂盒做步移最后结果怎样，我最近也在做，还没出结果，有没有什么经验或者需要特别注意的事项，麻烦支支招，谢谢！
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9楼2015-04-29 09:37:15
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偶尔--apple

铁虫 (初入文坛)
你好，请问你的步移最后结果怎样？我最近也在做步移，还没有结果，想请教一下其中需要特别注意的事情有哪些？谢谢！
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10楼2015-04-29 10:17:01
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