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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Takara基因步移试剂盒-AP引物
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zhghlj

新虫 (小有名气)

[求助] Takara基因步移试剂盒-AP引物 已有4人参与

最近在做基因步移实验，使用的是Takara的genome walking kit，价格比较贵，请问各种大神，有没有知道该试剂盒中的4个AP引物序列，我想单独订购一下。
万分感谢
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1楼 2014-05-30 10:59:46
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-30 20:20:07
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhghlj at 2014-05-30 14:48:26
那您是指程序还使用Takara公司试剂盒说明书中的程序，而把引物换做文献中的随即引物？
谢谢...

PCR程序和体系都不太一样，你看看刘耀光的文章就知道了，我用takara 的这个试剂盒一直P不出合适的条带，用刘耀光的就做出来了。
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zhghlj
6楼2014-05-30 15:06:42
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhghlj at 2014-05-30 15:33:36
能麻烦你把那篇文献发给我吗？我看这个作者写了好多篇文章 不太清楚您具体指的哪一篇的方法，十分感谢！...

High-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR for amplification of unknown flanking sequences
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zhghlj
8楼2014-05-30 17:03:34
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-30 11:27:36
应该没人知道吧，要是有人知道干嘛买公司的。我用过这个试剂盒，觉得没有刘耀光文章里的随机引物好用，你可以考虑用刘耀光的随机引物。
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3楼2014-05-30 11:26:09
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普通回帖

冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-30 11:27:18
我们实验室也做步移，不过不用TAKARA的试剂盒  25次 5000块  引物序列是人家保密的 貌似人家就是卖这个挣钱
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生命不息奋斗不止
2楼2014-05-30 11:17:42
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zhghlj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2014-05-30 11:17:42
我们实验室也做步移，不过不用TAKARA的试剂盒  25次 5000块  引物序列是人家保密的 貌似人家就是卖这个挣钱

但是我这边用的比较多，而且步移时条件摸索也要浪费几微升的AP引物 好心疼啊。。。你们那个试剂盒是哪个公司的呢？ 大概可以步移出多长的片段呢？
谢谢！
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4楼2014-05-30 14:47:05
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zhghlj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-05-30 11:26:09
应该没人知道吧，要是有人知道干嘛买公司的。我用过这个试剂盒，觉得没有刘耀光文章里的随机引物好用，你可以考虑用刘耀光的随机引物。

那您是指程序还使用Takara公司试剂盒说明书中的程序，而把引物换做文献中的随即引物？
谢谢
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5楼2014-05-30 14:48:26
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zhghlj

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-05-30 15:06:42
PCR程序和体系都不太一样，你看看刘耀光的文章就知道了，我用takara 的这个试剂盒一直P不出合适的条带，用刘耀光的就做出来了。...

能麻烦你把那篇文献发给我吗？我看这个作者写了好多篇文章 不太清楚您具体指的哪一篇的方法，十分感谢！
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7楼2014-05-30 15:33:36
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhghlj at 2014-05-30 14:47:05
但是我这边用的比较多，而且步移时条件摸索也要浪费几微升的AP引物 好心疼啊。。。你们那个试剂盒是哪个公司的呢？ 大概可以步移出多长的片段呢？
谢谢！...

我们实验室有人做 你不是有3条引物么  他们直接使用2条引物  ABC三条引物  第一次使用的时候 使用AB 下一次使用的时候使用BC 在下一次使用AC 这样就能多用几次  我们实验室就这样搞 没问题 楼下实验室也是这样做的
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zhghlj
生命不息奋斗不止
9楼2014-05-31 13:13:12
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zhghlj

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-05-30 17:03:34
High-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR for amplification of unknown flanking sequences...

十分感谢！！
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10楼2014-06-03 09:25:47
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