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damo8912

铜虫 (初入文坛)

[求助] 染色体步移求助

用的酶切加接头的两次PCR的方法,第一次PCR结果弥散,第二次PCR结果还是弥散。求助各位,在做步移的时候需要注意些什么。
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damo8912

铜虫 (初入文坛)

求助阿   做了好几遍了  好浪费钱啊
2楼2013-07-21 15:07:07
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damo8912

铜虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by 爱的天使13 at 2013-07-21 15:54:09
那第三次的PCR结果怎么样啊?前两次弥散很正常啊

我是加接头那种 只有两次PCR啊
5楼2013-07-22 15:38:18
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damo8912

铜虫 (初入文坛)

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4楼: Originally posted by 爱的天使13 at 2013-07-21 15:55:53
如果其他都正常,注意稀释倍数就可以啊

请问一般稀释多少  我稀释到500都没出  一直可以稀释多少啊
6楼2013-07-22 15:38:56
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damo8912

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 偶尔--apple at 2015-04-29 10:17:01
你好,请问你的步移最后结果怎样?我最近也在做步移,还没有结果,想请教一下其中需要特别注意的事情有哪些?谢谢!

我没用那个  我用的是酶切 加接头的方法      我也不知道注意什么  做几遍就出来了
11楼2015-04-30 20:04:15
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damo8912

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by a282398454 at 2015-05-01 15:20:48
同志,我最近也要准备开始做这个了,所以请问下对于模板的要求是如何呢?(提的基因组浓度,纯度)还有请问你是用什么方法提的基因组DNA?能不能留下你的扣扣,想好好找你交流下!

我提的是烟草的   CTAB法   , 我不懂这个 。重复了几遍, 后来出来了。 我也不知道是哪改变了。模板肯定是越纯越好吧。
13楼2015-05-04 16:38:27
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