| 查看: 3201 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
夏天Western Blot 曝光总是白片
|
||
|
请教各位WB高手 有没有遇到过夏天（外界气温较高）做WB 胶片曝光曝不出来的情况？ 我们实验室长期都在做WB 在天气冷的时候做WB一点问题没有 可是到了天热 WB总是大把大把白片情况出现 以下是我们采取的对策 1显影定影是刚换的 2 一抗为冰箱4度孵育过夜（12h） 3 二抗则是4摄氏度冰箱孵育 （怕牛奶HRP的二抗发酵坏掉 一般二抗孵育小于8h ） 3曝光前 还会把PBST洗好的膜（10min/次 共4次）放在冰箱4度1h左右 （尝试是不是因为膜的温度过高而影响ECL液的酶促反应） 4PS. 做胶的技术应该不会出现问题 跑胶正常 嗅酚蓝刚漂停止跑胶（marker清晰可见 水平 ） 转膜没有4度的条件 就用的预冷的trans buffer转膜 转膜后的PVDF膜上marker也清晰可见 膜与胶之间没有气泡 感觉该做的都做了 该小心的都小心了 可是曝光的时候总是大片白片出现 运气好的话可能会出现某一张膜有条带 其他膜白片 或者是荧光一下子就淬灭的情况 请教各位高手 不胜感激 [ Last edited by 杀生丸殿下_q on 2013-7-5 at 22:38 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
材料考研调剂
已经有3人回复
-
346求调剂[0856]
已经有6人回复
-
281求调剂（0805）
已经有18人回复
-
294求调剂材料与化工专硕
已经有9人回复
-
288求调剂
已经有4人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有12人回复
-
一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂
已经有5人回复
-
085601材料工程专硕求调剂
已经有7人回复
-
321求调剂
已经有6人回复
-
一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- western blot没有结果是怎么回事~~
已经有12人回复
- western blot 条带
已经有15人回复
- western blot 出不来结果！！！
已经有17人回复
- western-blot 技术
已经有12人回复
- Western Blot的问题（关于重复性和显色）
已经有11人回复
- Western Blot出现问题
已经有19人回复
- western blot 第一次曝光有条带，而且浓厚，第二次就没有了。。。
已经有13人回复
- 关于western blot
已经有4人回复
- 关于western blot的小问题
已经有12人回复
- western blot方法大全
已经有237人回复
- western blot中蛋白质转印问题
已经有17人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- 提供Western blot技术服务
已经有63人回复
- western blot的问题
已经有9人回复
- western blot 求助，请高手指点一下
已经有8人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 关于western blot转膜
已经有20人回复
- 【求助/交流】western blot 缺带 断带
已经有21人回复
- 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
已经有19人回复
- 【求助/交流】western blot 显影后发现条带中空，求解答。
已经有8人回复
- Western Blot 磷酸化蛋白测定问题
已经有9人回复
4楼2013-07-06 16:08:08
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 4
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-07-06 00:56:19
1759005335
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 186.2
- 帖子: 17
- 在线: 13.7小时
- 虫号: 2478609
- 注册: 2013-05-23
- 性别: GG
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
3楼2013-07-06 10:37:14
5楼2013-07-06 16:09:42
