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小小米呐

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE问题汇集 已有1人参与

请问最近在做PAGE时出现一些问题:
1、刚开始两层胶,6%浓缩胶1小时,12%分离胶4小时,为什么会这么长时间?
2、跑出来胶上Marker完全没能显示?
3、后来想尝试三层胶的,配置分离胶电泳胶和浓缩胶电泳胶时Bis一直不溶,超声波震动也不行?
4、什么情况下需要用三层胶跑电泳呢?
5、我的样品是没加热在,需要吗?
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青荷初想

铜虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-05 08:22:55
你是大板,还是小板?在我们实验室大板5个小时很正常,小板3小时左右吧。
至于Maker没显示,染色液确定没问题?你的Tri-Hcl PH值有没有搞错。
样品煮过一次后,以后是可以直接上样的。
2楼2013-07-04 13:33:53
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小小米呐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 青荷初想 at 2013-07-04 13:33:53
你是大板,还是小板?在我们实验室大板5个小时很正常,小板3小时左右吧。
至于Maker没显示,染色液确定没问题?你的Tri-Hcl PH值有没有搞错。
样品煮过一次后,以后是可以直接上样的。

是中板吧,可以装15ML体积的胶;可是其他样品都可以显色,染色大概有一个小时;样品可以不煮吗,煮后没影响吗?
3楼2013-07-04 17:38:06
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青荷初想

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小小米呐 at 2013-07-04 17:38:06
是中板吧,可以装15ML体积的胶;可是其他样品都可以显色,染色大概有一个小时;样品可以不煮吗,煮后没影响吗?...

样品第一次加了loadingbuffer以后是要煮的,剩余没用完的可以放在-30℃保存,之后就可以直接上样!
4楼2013-07-05 13:16:21
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小小米呐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 青荷初想 at 2013-07-05 13:16:21
样品第一次加了loadingbuffer以后是要煮的,剩余没用完的可以放在-30℃保存,之后就可以直接上样!...

是在想能不能不加热直接加样
5楼2013-07-05 22:53:11
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青荷初想

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小小米呐 at 2013-07-05 22:53:11
是在想能不能不加热直接加样...

这个不可以!
6楼2013-07-06 10:17:53
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