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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE问题汇集
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小小米呐

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE问题汇集 已有1人参与

请问最近在做PAGE时出现一些问题：
1、刚开始两层胶，6%浓缩胶1小时，12%分离胶4小时，为什么会这么长时间？
2、跑出来胶上Marker完全没能显示？
3、后来想尝试三层胶的，配置分离胶电泳胶和浓缩胶电泳胶时Bis一直不溶，超声波震动也不行？
4、什么情况下需要用三层胶跑电泳呢？
5、我的样品是没加热在，需要吗？
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1楼 2013-07-04 10:41:29
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青荷初想

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-05 08:22:55
你是大板，还是小板？在我们实验室大板5个小时很正常，小板3小时左右吧。
至于Maker没显示，染色液确定没问题？你的Tri-Hcl PH值有没有搞错。
样品煮过一次后，以后是可以直接上样的。
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2楼2013-07-04 13:33:53
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小小米呐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 青荷初想 at 2013-07-04 13:33:53
你是大板，还是小板？在我们实验室大板5个小时很正常，小板3小时左右吧。
至于Maker没显示，染色液确定没问题？你的Tri-Hcl PH值有没有搞错。
样品煮过一次后，以后是可以直接上样的。

是中板吧，可以装15ML体积的胶；可是其他样品都可以显色，染色大概有一个小时；样品可以不煮吗，煮后没影响吗？
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3楼2013-07-04 17:38:06
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青荷初想

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小小米呐 at 2013-07-04 17:38:06
是中板吧，可以装15ML体积的胶；可是其他样品都可以显色，染色大概有一个小时；样品可以不煮吗，煮后没影响吗？...

样品第一次加了loadingbuffer以后是要煮的，剩余没用完的可以放在-30℃保存，之后就可以直接上样！
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4楼2013-07-05 13:16:21
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小小米呐

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 青荷初想 at 2013-07-05 13:16:21
样品第一次加了loadingbuffer以后是要煮的，剩余没用完的可以放在-30℃保存，之后就可以直接上样！...

是在想能不能不加热直接加样
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5楼2013-07-05 22:53:11
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青荷初想

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小小米呐 at 2013-07-05 22:53:11
是在想能不能不加热直接加样...

这个不可以！
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6楼2013-07-06 10:17:53
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