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cly2810

金虫 (正式写手)

[求助] 菜鸟求助:PCR扩增和扩增产物的克隆??

书上如是说:在许多研究中,需要将PCR产物克隆,以获得目的DNA片段。

我不明白的地方是,要获得目的DNA片段就是通过PCR。PCR的产物就是DNA片段,要将产物克隆就是要获得更多的片段,继续PCR不就行了么??

我理解的是PCR的产物中只有两条模板链是长的,其他的都是短的对吗?可以P出与模板链一样长的链吗??


菜鸟问题,大虾见笑
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cly2810

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 547star at 2013-07-09 08:05:23
"我理解的是PCR的产物中只有两条模板链是长的,其他的都是短的对吗?可以P出与模板链一样长的链吗??"

除了模板还是原来那么长(排除在反应中被降解的理想情况下),还会以线性增长扩增一头是引物,一 ...

可不可以这样理解:PCR扩增并不能确保特异性,而经过酶切、连接到载体、克隆等步骤则可以保证目的片段的特异性扩增以及表达?
PCR是一个富集过程,而克隆等则有筛选的作用?
8楼2013-10-10 16:10:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 中肯的建议! 2013-07-03 02:10:23
我觉得你需要补充一下分子生物学基础知识。
2楼2013-07-03 00:28:19
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-03 02:10:06
cly2810: 金币+1, 有帮助 2013-07-09 16:43:03
PCR产物克隆,进一步鉴定,比如测序,才知道是否是目的DNA片段,而且,PCR产物有的是有突变的,不一定符合实验需要。
为什么
3楼2013-07-03 02:02:01
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cly2810

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:28:19
我觉得你需要补充一下分子生物学基础知识。

废话
4楼2013-07-04 13:54:51
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