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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菜鸟求助：PCR扩增和扩增产物的克隆？？
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cly2810

金虫 (正式写手)

[求助] 菜鸟求助：PCR扩增和扩增产物的克隆？？

书上如是说：在许多研究中,需要将PCR产物克隆,以获得目的DNA片段。

我不明白的地方是，要获得目的DNA片段就是通过PCR。PCR的产物就是DNA片段，要将产物克隆就是要获得更多的片段，继续PCR不就行了么？？

我理解的是PCR的产物中只有两条模板链是长的，其他的都是短的对吗？可以P出与模板链一样长的链吗？？


菜鸟问题，大虾见笑
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1楼 2013-07-02 16:55:37
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-07-03 02:10:06
cly2810: 金币+1, ★有帮助 2013-07-09 16:43:03
PCR产物克隆，进一步鉴定，比如测序，才知道是否是目的DNA片段,而且，PCR产物有的是有突变的，不一定符合实验需要。
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为什么
3楼2013-07-03 02:02:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 中肯的建议！ 2013-07-03 02:10:23
我觉得你需要补充一下分子生物学基础知识。
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2楼2013-07-03 00:28:19
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cly2810

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:28:19
我觉得你需要补充一下分子生物学基础知识。

废话
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4楼2013-07-04 13:54:51
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nxguojunxian

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励新虫交流 2013-07-09 13:06:06
cly2810: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2013-07-09 16:42:41
关于你的这段话的2个问题：
1 PCR就是对目的DNA的富集过程。如果只想做多态性研究就不必做克隆，但以下情况需要你做克隆：a:要测序的目的片段较短，需要连到载体克隆后测序；b:认为目的基因内存在杂合位点，碱基的缺失和突变等情况；c:下一步试验的需要，比如需要对目的基因进行功能研究 ;
2 既然PCR是目的DNA富集的过程，经过30轮左右的指数定增过程，最终PCR产物中都是您的目的DNA大小的DNA片段。
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5楼2013-07-08 16:24:52
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