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cly2810

金虫 (正式写手)

[求助] 菜鸟求助:PCR扩增和扩增产物的克隆??

书上如是说:在许多研究中,需要将PCR产物克隆,以获得目的DNA片段。

我不明白的地方是,要获得目的DNA片段就是通过PCR。PCR的产物就是DNA片段,要将产物克隆就是要获得更多的片段,继续PCR不就行了么??

我理解的是PCR的产物中只有两条模板链是长的,其他的都是短的对吗?可以P出与模板链一样长的链吗??


菜鸟问题,大虾见笑
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nxguojunxian

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励新虫交流 2013-07-09 13:06:06
cly2810: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2013-07-09 16:42:41
关于你的这段话的2个问题:
1 PCR就是对目的DNA的富集过程。如果只想做多态性研究就不必做克隆,但以下情况需要你做克隆:a:要测序的目的片段较短,需要连到载体克隆后测序;b:认为目的基因内存在杂合位点,碱基的缺失和突变等情况;c:下一步试验的需要,比如需要对目的基因进行功能研究 ;
2 既然PCR是目的DNA富集的过程,经过30轮左右的指数定增过程,最终PCR产物中都是您的目的DNA大小的DNA片段。
5楼2013-07-08 16:24:52
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 中肯的建议! 2013-07-03 02:10:23
我觉得你需要补充一下分子生物学基础知识。
2楼2013-07-03 00:28:19
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-03 02:10:06
cly2810: 金币+1, 有帮助 2013-07-09 16:43:03
PCR产物克隆,进一步鉴定,比如测序,才知道是否是目的DNA片段,而且,PCR产物有的是有突变的,不一定符合实验需要。
为什么
3楼2013-07-03 02:02:01
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cly2810

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:28:19
我觉得你需要补充一下分子生物学基础知识。

废话
4楼2013-07-04 13:54:51
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