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汕头大学海洋科学接受调剂
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弱弱的问

新虫 (初入文坛)

[求助] 定量PCR扩增曲线求助，急求

我做的定量PCR扩增曲线为什么在零线以下，多次重复一直都是在零线以下，跪求各位大侠指点一二啊，这些天头疼死了！急求啊……
定量PCR扩增曲线求助，急求
定量1.png
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1楼 2013-07-02 09:49:23
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弱弱的问

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by vicky8685 at 2013-07-03 14:30:47
从零线以下开始的扩增曲线一般与你使用的PCR试剂质量有关，但是从你这个图看，那上面的那两条扩增曲线是正常的啊，能否详细以下你的实验咯...

我就只加一个模板DNA，上下游引物，PCR混合液，扩增曲线都在下面，模板浓度分别为50nM，100nM，200nM，上面那个是NTC，刚开始怀疑上下游引物或者摸版被污染了，就都是刚配的，但是还是这样子，就不知道什么原因了
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5楼2013-07-03 17:58:51
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vicky8685

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流，分子生物期待你更多精彩。如果 非应助的话请点击不应助按钮谢谢 2013-07-03 08:21:07
你好，你这个是荧光PCR么？我也有做荧光PCR，请问你的PCR仪是什么牌子和型号的？我们一般横坐标是CT值，你这个是检测什么项目的？
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怪兽
2楼2013-07-02 10:00:53
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弱弱的问

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by vicky8685 at 2013-07-02 10:00:53
你好，你这个是荧光PCR么？我也有做荧光PCR，请问你的PCR仪是什么牌子和型号的？我们一般横坐标是CT值，你这个是检测什么项目的？

不好意思，一着急，把横坐标写错了，横坐标就是CT值，我也做荧光定量PCR，在伯乐买的。我就是想P一下模板，以前做出来了，这几次一做扩增曲线就在零线一下，不知道为什么？帮我分析一下吧啊
定量PCR扩增曲线求助，急求-1
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3楼2013-07-03 09:55:10
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vicky8685

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 弱弱的问 at 2013-07-03 09:55:10
不好意思，一着急，把横坐标写错了，横坐标就是CT值，我也做荧光定量PCR，在伯乐买的。我就是想P一下模板，以前做出来了，这几次一做扩增曲线就在零线一下，不知道为什么？帮我分析一下吧啊

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...

从零线以下开始的扩增曲线一般与你使用的PCR试剂质量有关，但是从你这个图看，那上面的那两条扩增曲线是正常的啊，能否详细以下你的实验咯
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怪兽
4楼2013-07-03 14:30:47
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