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弱弱的问

新虫 (初入文坛)

[求助] 定量PCR扩增曲线求助,急求

我做的定量PCR扩增曲线为什么在零线以下,多次重复一直都是在零线以下,跪求各位大侠指点一二啊,这些天头疼死了!急求啊……
定量PCR扩增曲线求助,急求
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vicky8685

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 弱弱的问 at 2013-07-03 09:55:10
不好意思,一着急,把横坐标写错了,横坐标就是CT值,我也做荧光定量PCR,在伯乐买的。我就是想P一下模板,以前做出来了,这几次一做扩增曲线就在零线一下,不知道为什么?帮我分析一下吧啊

Graph1.png
...

从零线以下开始的扩增曲线一般与你使用的PCR试剂质量有关,但是从你这个图看,那上面的那两条扩增曲线是正常的啊,能否详细以下你的实验咯
怪兽
4楼2013-07-03 14:30:47
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vicky8685

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流,分子生物期待你更多精彩。如果 非应助的话请点击不应助按钮谢谢 2013-07-03 08:21:07
你好,你这个是荧光PCR么?我也有做荧光PCR,请问你的PCR仪是什么牌子和型号的?我们一般横坐标是CT值,你这个是检测什么项目的?
怪兽
2楼2013-07-02 10:00:53
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弱弱的问

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by vicky8685 at 2013-07-02 10:00:53
你好,你这个是荧光PCR么?我也有做荧光PCR,请问你的PCR仪是什么牌子和型号的?我们一般横坐标是CT值,你这个是检测什么项目的?

不好意思,一着急,把横坐标写错了,横坐标就是CT值,我也做荧光定量PCR,在伯乐买的。我就是想P一下模板,以前做出来了,这几次一做扩增曲线就在零线一下,不知道为什么?帮我分析一下吧啊
定量PCR扩增曲线求助,急求-1
Graph1.png

3楼2013-07-03 09:55:10
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弱弱的问

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by vicky8685 at 2013-07-03 14:30:47
从零线以下开始的扩增曲线一般与你使用的PCR试剂质量有关,但是从你这个图看,那上面的那两条扩增曲线是正常的啊,能否详细以下你的实验咯...

我就只加一个模板DNA,上下游引物,PCR混合液,扩增曲线都在下面,模板浓度分别为50nM,100nM,200nM,上面那个是NTC,刚开始怀疑上下游引物或者摸版被污染了,就都是刚配的,但是还是这样子,就不知道什么原因了
5楼2013-07-03 17:58:51
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