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Pushing2012金虫 (正式写手)
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双酶切后转化
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| 本人将载体pet28（5400bp左右）和目的基因（1000bp）做双酶切(bamH1, Not1）后，连接，然后转化，每次平板上都长一大堆菌落出来，反复挑了24个单克隆，一个都没有装进目的基因的，而且电泳检测发现单克隆中提取的质粒大小仅有3000-4000bp. 将酶切产物检测发现质粒酶切后出现3条带以上，这个酶切后出现多条带shi怎么回事？还有为啥没有阳性克隆出现，而且比空载体还小？我都要崩溃了，请各位大虾帮帮忙。 |
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武穆大成
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