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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落pcr没结果
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ruudsossu

银虫 (初入文坛)

[交流] 菌落pcr没结果

利用Cre/loxp已经成功连接上两个目的基因，现在连接第三个基因做菌落pcr时总是没结果，大神们给提供件些建议吧，引物肯定没问题，技术也很成熟，连接前两个基因时非常顺利，第三个各种大白板。。。折磨人啊，感谢给位大神了
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1楼 2013-05-24 08:14:43
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ruudsossu

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-05-24 19:08:36
退火温度那些个吧...有没有阳性对照试试....我今天第一次菌落PCR,飘飘亮亮的..或者是你有位点突变了..3'不配对没办法扩增的

已经测过序了，没问题，问了很多人也说没问题，就是阳性的太少了，又来筛选的酶活性不是很强
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18楼2013-05-24 23:28:55
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asdry

木虫 (职业作家)
★
ruudsossu(金币+1): 谢谢参与
祝楼主诸事顺利，心想事成！
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5楼2013-05-24 08:50:00
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ruudsossu

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 草样年花 at 2013-05-24 11:05:23
质粒酶切

阳性的数量很少啊，怎么进行质粒酶切呢
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8楼2013-05-24 14:12:46
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