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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦


[求助] 帮忙分析PCR结果

这是我做的PCR凝胶电泳图,2%,60V,30min
第二第三第八泳道上方弥散的现象可能会是什么原因造成的?
帮忙分析PCR结果
1.jpg
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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦


最后一个泳道是对照,上方的弥散最严重
2楼2013-05-23 13:55:33
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sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一感觉是引物设计的问题,会导致出现弥散条带,第二是PCR没有扩增出目的条带,楼主需要调整PCR体系再试试,第三聚合酶量过多也会出现这种情况
要么读书,要么旅行,身体和灵魂,必须有一个在路上
7楼2013-05-24 14:22:48
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普通回帖

1243146885

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
沾欢欢(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-23 15:38:50
没跑开吧。东西加的对吗?你的mark是2000的,确定目的片段在2000以里吗?
3楼2013-05-23 14:27:30
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kikiwitch

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
对照是没加模板的?
4楼2013-05-23 17:14:51
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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦


引用回帖:
4楼: Originally posted by kikiwitch at 2013-05-23 17:14:51
对照是没加模板的?

是的,没加模板,有引物二聚体
5楼2013-05-24 09:37:24
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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 沾欢欢 at 2013-05-24 09:37:24
是的,没加模板,有引物二聚体...

引物二聚体应该是最下面那个啊,你目的条带呢?
6楼2013-05-24 13:31:41
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
模板多了,还是引物多了。。。
只为自己所要的幸福快乐
8楼2013-05-24 15:25:53
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sjtea

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人觉得还是引物特异性的问题,看图片没发现有目的条带。是做了很多次都是这样,还是就一次的结果?如果是很多次,肯定是引物或者PCR体系有问题,如果就是一次建议再试试
一路有言笑,且行且珍惜
9楼2013-05-24 16:19:09
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wulj513

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人认为你没有扩增出目的条带,你那些弥散的条带很可能是你的模板cDNA,并且你的引物二聚体也比较严重,建议你再重新核实一下你的引物对不对。
有所弃才有所为,有所为才有所不为!
10楼2013-05-25 13:20:12
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