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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 帮忙分析PCR结果
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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦

[求助] 帮忙分析PCR结果

这是我做的PCR凝胶电泳图,2%,60V,30min
第二第三第八泳道上方弥散的现象可能会是什么原因造成的?
帮忙分析PCR结果
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1楼2013-05-23 13:53:56
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦
最后一个泳道是对照,上方的弥散最严重
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2楼2013-05-23 13:55:33
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sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一感觉是引物设计的问题，会导致出现弥散条带，第二是PCR没有扩增出目的条带，楼主需要调整PCR体系再试试，第三聚合酶量过多也会出现这种情况
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要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
7楼2013-05-24 14:22:48
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普通回帖

1243146885

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
沾欢欢(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-23 15:38:50
没跑开吧。东西加的对吗？你的mark是2000的，确定目的片段在2000以里吗？
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3楼2013-05-23 14:27:30
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kikiwitch

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对照是没加模板的？
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4楼2013-05-23 17:14:51
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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦
引用回帖:
4楼: Originally posted by kikiwitch at 2013-05-23 17:14:51
对照是没加模板的？

是的,没加模板,有引物二聚体
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5楼2013-05-24 09:37:24
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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 沾欢欢 at 2013-05-24 09:37:24
是的,没加模板,有引物二聚体...

引物二聚体应该是最下面那个啊，你目的条带呢？
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6楼2013-05-24 13:31:41
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我很快乐3A87

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
模板多了，还是引物多了。。。
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只为自己所要的幸福快乐
8楼2013-05-24 15:25:53
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sjtea

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人觉得还是引物特异性的问题，看图片没发现有目的条带。是做了很多次都是这样，还是就一次的结果？如果是很多次，肯定是引物或者PCR体系有问题，如果就是一次建议再试试
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一路有言笑，且行且珍惜
9楼2013-05-24 16:19:09
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wulj513

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人认为你没有扩增出目的条带，你那些弥散的条带很可能是你的模板cDNA，并且你的引物二聚体也比较严重，建议你再重新核实一下你的引物对不对。
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有所弃才有所为，有所为才有所不为！
10楼2013-05-25 13:20:12
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