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xiaomuxiaoma铁虫 (小有名气)
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pcr污染怎么办？
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这样pcr出来的结果是试剂污染了吗？应该怎样排查是哪种试剂污染了啊？ 原来的pcr体系受到了污染，不加模板也能扩出来，先设计一实验，想确定是那种成分受到了污染。 2-6号为分别使用原来的buffer，Mg2+，dNTP，primer1,primer2中的一种，其他的四种成分都用新的，酶都还是用原来的，体系中不加模板，扩出的结果 7号为加了模板，扩出来正常， 8号为用购买的pcr mix（buffer，mg2+,dNTP，Taq预混好）加primer1，primer2，不加模板扩出来的。 目标片段283bp marker条带分别为1200,900，750,600,450,300,150 H2O也是另换的一瓶水。 各位帮忙分析一下，这可能是什么被污染了？  |
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2楼2012-04-13 15:33:42
zgb1982
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3楼2012-04-13 15:39:29
lvbobo823
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【答案】应助回帖
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xiaomuxiaoma: 金币+1, ★有帮助 2012-04-17 10:50:07
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我实验室也遇到这种情况，也像你一样把BUffer，酶，水都换了发现没解决，最后发现是枪的问题，建议你去其他实验室(不做你那基因的),用人家的所有东西，别用自己的，估计就OK了。移液枪吸液时注意不要让液体误吸到枪体里，能清理的话隔一段时间用酒精洗一下。实验室做长了这种实验也会形成气溶胶，说不定就会跑到你的PCR体系里，建议这种易污染的实验在无菌操作台里操作。 希望能帮到你，祝实验顺利！ |
4楼2012-04-13 17:06:53
5楼2017-11-21 12:02:04