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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR空白污染
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vs570588

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR空白污染

PCR空白（阴性对照）连续做了两次都有微弱的污染，不过稀释不同倍数的目的条带都很亮，用染料显色。想问问，这种细微污染会导致目的条带假阳性的出现吗？
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1楼2011-01-13 14:09:08
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taoqi1986918

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主和我之前遇到的问题很一样 希望你能休息一段时间 做DGGE很伤身体的哦 PCR污染是很要命的 也很不好解释 其实那些原因都好说 你要怀疑其实什么都是原因 哈哈
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11楼2013-05-31 14:28:30
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普通回帖

love_st

金虫 (著名写手)
★
silicare(金币+1):谢谢参与 2011-01-13 14:17:41
阴性污染一定要找出污染原因，严格来说PCR阴性对照有扩增那整个实验只能重做了
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2楼2011-01-13 14:16:04
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★
rainwander(金币+2):哈哈，鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-13 17:35:37
阴性不阴，阳性不阳，是没有人相信你的数据的

这就是设置对照的用意
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3楼2011-01-13 14:17:18
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天使托

专家顾问 (职业作家)
同意楼上！
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4楼2011-01-13 14:22:42
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路人甲007

木虫 (正式写手)
阴性对照做出来了 说明你的样品组说明不了问题啊
要找到原因
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5楼2011-01-13 14:32:56
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yabxxh

木虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-13 17:35:45
这可不是细微的污染哦，要知道极微量的模板在指数级的增长下，也是可以被放大很多倍的，所以要想办法排除掉，污染源要找到，来自水还是空气啊，这个还是要很小心的
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6楼2011-01-13 15:40:10
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hello466725

金虫 (初入文坛)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-13 17:35:49
只能重做。。。
找到原因。
实在不行就无菌台操作。或许有用。。。
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7楼2011-01-13 15:48:12
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vs570588

木虫 (正式写手)
我实验室其他人，昨天做了，没有出现污染，我现在怀疑是我在做的过程中不小心引入的，因为我用的premix 宝生物的，引物和水自己加。很有可能是模板DNA污染了空白。
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8楼2011-01-14 10:07:17
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vs570588

木虫 (正式写手)
再补充我的后续试验DGGE，切胶，克隆测序。
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9楼2011-01-14 10:13:21
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三国恋

银虫 (小有名气)
★
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我做指数扩增 污染一直出来 头疼死了。
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10楼2013-05-31 11:08:15
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暖如夏天

禁虫 (初入文坛)
★
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12楼2014-04-17 17:52:16
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