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xiaomuxiaoma

铁虫 (小有名气)

[求助] pcr污染怎么办?

这样pcr出来的结果是试剂污染了吗?应该怎样排查是哪种试剂污染了啊?

原来的pcr体系受到了污染,不加模板也能扩出来,先设计一实验,想确定是那种成分受到了污染。
2-6号为分别使用原来的buffer,Mg2+,dNTP,primer1,primer2中的一种,其他的四种成分都用新的,酶都还是用原来的,体系中不加模板,扩出的结果
7号为加了模板,扩出来正常,
8号为用购买的pcr mix(buffer,mg2+,dNTP,Taq预混好)加primer1,primer2,不加模板扩出来的。
目标片段283bp
marker条带分别为1200,900,750,600,450,300,150
H2O也是另换的一瓶水。
各位帮忙分析一下,这可能是什么被污染了?
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zgb1982

木虫 (正式写手)

我这两天也遇到PCR污染的问题,也没找到具体的污染源,不过觉得应该是引物的问题,也是用的商品化的PCRMIX,今天不加模板扩了五个,四个都有条带,有一个还特别亮,有一个没条带,很是奇怪.
3楼2012-04-13 15:39:29
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